刘海姣 范轶鑫 潘秀秀 姜来 刘文涛 张广钦

    ·实验研究·

    原花青素对小鼠急性痛风性关节炎的实验研究

    刘海姣 范轶鑫 潘秀秀 姜来 刘文涛 张广钦

    目的利用小鼠急性痛风性关节炎模型,评估原花青素对于单钠尿酸盐(MSU)晶体诱发的关节肿胀及疼痛的治疗作用。方法将MSU晶体直接注射到小鼠踝关节腔,然后利用缚线法测定小鼠踝关节周径,Von Frey Hairs测定小鼠机械痛阈值,Western Blot检测P38的磷酸化水平,考察原花青素对急性痛风性关节肿胀和疼痛的治疗作用。结果原花青素给药组(15、30、60 mg/kg)的机械痛阈值、踝关节周径与模型组相比差异均具有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 药物 原花青素(南京泽朗植提技术有限公司)；尿酸钠(Sigma-Aldrich公司)。

    1.2 动物 30只雄性CD-1小鼠,清洁级,体重18～22 g,由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供,实验动物使用许可证号：SCXK (沪) 2013-0016。

    1.3 仪器 电泳仪(美国 Bio-Rad公司)；化学发光仪(ChemiDoc XRS+,美国 Bio-Rad公司)。

    1.4 方法

    1.4.1 MSU晶体的制备 称取尿酸钠,加至1 mol/L的氢氧化钠中,再加入无菌生理盐水煮沸溶解,冷却至室温后,调节pH到7.2,离心吸取上清,室温静置2 d使MSU晶体析出,离心弃上清得MSU晶体,临用前经超声并且配置出所需浓度。

    1.4.2 急性痛风模型的建立以及小鼠机械痛阈值和关节肿胀度的测定 小鼠使用水合氯醛(400 mg/kg,腹腔注射) 麻醉,将MSU晶体(0.5 mg/10 μl)注射至小鼠踝关节胫附踝关节腔,对照组注射等量的磷酸缓冲盐溶液(PBS)。采用缚线法测量小鼠踝关节周径,使用Von Frey Hairs测痛仪测量小鼠机械痛阈值。分别测量小鼠造模前和造模后不同时间点的周径,测量小鼠造模前和造模后不同时间点的机械痛阈值,并计算造模后周径与造模前周径的差值作为关节肿胀度的衡量标准 ......