彭大颖 吴 迪

    肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系分析

    彭大颖 吴 迪

    目的分析肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞(AMSCs)的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系。方法体外培养AMSCs, 收集其上清液制备培养基培养HCT116细胞。利用Transwell培养板共培养AMSCs与HCT116细胞。通过检测穿透人工基底胶的能力对比两种培养条件下HCT116细胞侵袭能力的差异, 同时采用酶联免疫吸附实验(ELISA) 检测共培养后AMSCs旁分泌因子表达变化情况。

    肿瘤环境；人类脂肪间充质干细胞；旁分泌特征；肿瘤细胞侵袭能力

    最近几年随着生活环境、生活方式以及饮食习惯等改变,肿瘤的发生率呈显著上升趋势, 严重影响患者的生活质量,是威胁人类健康和生命安全的重大疾病, 也是国内外临床医学的研究热点[1,2]。根据相关研究报道, 在肥胖群体中, 肿瘤的发生和不良预后均高于正常体质量指数的群体, 本次研究为了分析肿瘤环境下AMSCs的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系, 通过培养AMSCs与HCT116细胞并对比不同培养条件下HCT116细胞侵袭能力以及AMSCs细胞旁分泌因子表达情况进行分析, 现将研究情况总结报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人脂肪组织来源于本院外科手术的非肿瘤患者,经医院伦理学委员会批准且获得患者知情同意书, 结肠癌细胞HCT116由人类肝细胞研究所实验室保存。

    1.2 方法及观察指标 细胞培养：于无菌条件下取脂肪组织,剪碎后置于胶原酶A中进行离心处理, 弃上清液和未消化漂浮组织, 使用红细胞裂解液裂解红细胞, 离心处理5 min后于培养基中培养, AMSCs细胞培养后取其上清液制备条件培养基,方法是AMSCs细胞培养24 h后收集培养上清液作为条件培养基继续培养HCT116细胞。共培养系统：于Transwell培养板共培养AMSCs与HCT116细胞, 通过检测穿透人工基底胶的能力对比两种培养条件下HCT116细胞侵袭能力的差异,同时采用ELISA检测共培养后AMSCs细胞VEGFC、FGF10、TNF-α以及IL-10的分泌情况, 分析肿瘤环境下AMSCs的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系 ......