线粒体损伤拮抗剂在Cr(Ⅵ)所致肝细胞凋亡中的保护作用
膜电位,空白对照,1材料与方法,2结果,3小结
朱武晖 王曼线粒体损伤拮抗剂在Cr(Ⅵ)所致肝细胞凋亡中的保护作用
朱武晖 王曼
目的 分析线粒体损伤拮抗剂在六价铬[Cr(Ⅵ)]所致肝细胞凋亡中的保护作用。方法 通过肝细胞培养以及模型的制备获得受试细胞, 分为空白对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组, 空白对照组:不采用Cr溶液处理传代细胞, 静置24 h。模型组:采用4 μM Cr(Ⅵ)单独处理24 h。低剂量组、中剂量组、高剂量组:分别在4 μM Cr(Ⅵ)溶液处理后, 采用0.5、1.0、1.5 μM 环孢霉素A (CsA)干预。每组试验10次。监测各组细胞存活率、三磷酸腺苷(ATP)、肝细胞凋亡率、Caspase-3活性、通透性转运孔(PTP)开放度、膜电位水平PTP、PTP的ATP、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)、总腺苷酸(TAN)、PTP的ATP/ADP。结果 五组间细胞存活率、ATP、肝细胞凋亡率、Caspase-3活性、PTP开放度、膜电位水平PTP、PTP的ATP、ADP、AMP、TAN、PTP的ATP/ADP比较, 差异均具有统计学意义(P<0.05), 除ATP、PTP的ATP/ADP外, 其余指标从模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、空白对照组存在递进关系, 高剂量组与低剂量组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 线粒体损伤拮抗剂在Cr(Ⅵ)所致肝细胞凋亡中发挥了保护作用。
铬;肝细胞凋亡;线粒体损伤拮抗剂
国际癌症研究所将铬确认为人类致癌物, 其Cr(Ⅵ)是当前毒性最强、致癌性最强的铬价态, 在细胞凋亡启动中发挥重要作用[1]。理论上线粒体损伤拮抗剂能够拮抗Cr(Ⅵ)所致线粒体损伤作用[2,3]。本次研究采用细胞研究, 分析线粒体损伤拮抗剂在Cr(Ⅵ)所致肝细胞凋亡中的保护作用。
1 材料与方法
1. 1 受试细胞 人胚肝细胞系L-02(L-02肝细胞), 来自上海中科院细胞培养中心。
1. 2 试剂与仪器 主要包括重铬酸钾(基准级, 含量99.99%以上), ATP, 新生牛血清, 二甲基亚砜, 细胞凋亡率监测剂 ......
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