雷清瑶

    中药鸡骨草为豆科相思子属植物广东相思子(abrus cantoniensis hance)的干燥全草, 其主要活性成分为生物碱类和黄酮类物质。传统中医认为, 鸡骨草具有疏肝止痛、清热解毒等功效, 现代药理研究表明鸡骨草具有促进脂质代谢、抗氧化应激、改善肝功能等作用, 对急慢性肝炎、肝硬化腹水、胃痛等疗效明确[1,2]。既往研究表明, 鸡骨草提取物对NAFLD大鼠肝组织具有改善调节作用, 本实验通过喂养大鼠高脂饲料以建立NAFLD模型, 观察鸡骨草对NAFLD大鼠肝组织ROCK、CD14表达水平的影响, 为肝损伤的临床诊疗提供参考, 现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 试验动物 SPF级SD雄性大鼠32只, 均由广东省医学实验动物中心提供, 体质量220～250 g。实验前均适应性喂养1周。采用随机数字法将32只大鼠分为对照组、模型组、辛伐他汀组、鸡骨草水提取物组, 每组8只。

    1.2 主要药物、试剂与仪器 鸡骨草(广州康臣药业有限公司)；核酸染料(北京赛百盛公司)；上样缓冲液、去核糖核酸酶水、Total RNA提取试剂(大连宝生物工程有限公司)；山羊抗大鼠ROCK-Ⅰ、ROCK-Ⅱ多克隆抗体(美国Santa Cruz生物工程公司)；免疫组化学试剂盒(武汉博士德生物工程公司)；Trizol试剂盒(美国invitrogen公司)；RT-PCR试剂盒(大连宝生生物工程有限公司)；核酸蛋白分析仪(美国贝克曼库尔特公司)。

    1.3 脂肪乳剂的制备 取市售一级猪油500 g, 置于高温加热, 直至融化, 后加入胆固醇180 g、吐温-80 50 ml, 冷却液化成油相；将160 g蔗糖、100 g全脂奶粉、40 g丙二醇加入500 ml蒸馏水中, 加热至70℃后加入20 g脱氧胆酸钠, 充分搅拌, 混合均匀成水相；将水相沿杯壁缓倒入油相, 搅拌均匀,置冷却后于4℃低温保存, 灌胃时55℃水浴溶化至可吸取 ......