彭妲

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 回顾性分析2016 年1 月～2017 年10 月在本院治疗的62 例PTC 患者的临床资料。①纳入标准：患者临床资料及随访资料完整；术后病理结果证实为PTC；有完整PTC 癌组织标本及癌旁组织标本；未合并其他甲状腺疾病。②排除标准：预计生存期<3 个月；术前接受过任何放化疗亦或分子靶向治疗；存在其他内分泌系统疾病；处于妊娠期或哺乳期的女性。患者中男12 例、女50 例,年龄23～49 岁、平均年龄(39.24±5.47)岁,肿瘤直径6～18 mm、平均肿瘤直径(12.13±2.05)mm,多发灶13 例,临 床分期：Ⅰ期19 例、Ⅱ期28 例、Ⅲ期15 例,淋巴结转移情况：转移40 例、无转移22 例。采集PTC 患者的石蜡包埋癌组织及其癌旁组织(距离癌组织>5 cm)标本,标本均由医院内2 名专业的病理医师进行严格鉴定。

    1.2 方法 ①PTC 癌组织及其癌旁组织中lnc RNA MIAT表达水平检测：将新鲜组织50～100 mg 研磨至粉末状,Trizol法提取组织总RNA,而后进行逆转录得到RNA 总量,将产物cDNA 取出后利用无酶水稀释至500 μl 并保存待用,反应体系为20 μl,包含引物、模板各5 μl,FastStart Universal SYBR Green Master (ROX)10 μl,而后进行qPCR 检测,其中MIAT正向引物：5'-GCTCACACCTCCTATTCCT-3',反向引物：5'-CTTCACCAACTCTCCCACT-3'；引物由华大基因生物科技有限公司合成,PCR 反应条件：温度95℃、5 min；95 ℃、30 s；60℃、30 s；72℃、30 s,共重复40 个循环,每个样本重复测量3 次取平均Ct 值,相对定量采用2-ΔΔCt法,ΔCt=Ct(目的基因)-Ct(管家基因),ΔΔCt=实验组ΔCt-对照组ΔCt ......