王红芳 余细球 叶静 范昭

    微小核糖核酸(miRNA)是一类高度保守的非编码小分子核糖核酸(RNA),可以特异性结合靶细胞mRNA,调控靶基因的蛋白表达,参与肿瘤的发生发展[1,2]。其中miR-34 在很多肿瘤细胞系中表达缺失,从而导致细胞增殖、抗凋亡和转移相关基因的表达增加,具有抑癌基因作用,如B 细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、白细胞分化抗原44(cd44)、Noch1 等[3]。survivin 作为凋亡抑制蛋白,是miR-34a 的靶基因之一,在细胞增殖和凋亡平衡中发挥重要调控作用。本研究通过荧光定量PCR 技术,检测miR-34 和survivin 基因在人结肠癌组织和癌旁组织中的表达情况,探讨二者与结肠癌发生、发展的关系及作用机制。

    1 资料与方法

    1.1一般资料 临床资料和标本取自2015 年1 月～2017 年12 月深圳市罗湖区人民医院和深圳市北大深圳医院32 例患者手术切除的新鲜组织,其中32 份结肠癌组织(腺癌)标本作为癌症组,32 份癌旁组织标本(据切缘>2 cm)作为癌旁组,均经病理组织学证实,且在-80℃条件下速冻保存。其中男20 例,女12 例；年龄41～73 岁,平均年龄(59.2±6.1)岁。所有标本收集均得到医院伦理委员会批准,获得患者知情同意并签字。

    1.2方法

    1.2.1总RNA 提取和miRNA 反转录 50 mg 组织剪碎后,按照Trizol(Invitrogen) 说明书提取总RNA,用分光光度仪检测提取总RNA 含量和纯度,抽提的RNA A260/A280为1.7～2.0 ......