杨柳 熊小平 马国斌 李昱 胡林 丁海强 曾圣强 王洪

    高脂血症是指人体内的血脂水平过高,严重危害人的身体健康,可引起各种急、慢性并发症[1]。尤其是植入心脏支架的患者,更应严格控制血脂水平[2,3]。近几十年来,如何有效降脂的问题越来越受到研究者的关注。目前,在临床常规治疗中应用的降脂药物种类较多,西药主要有他汀类、贝特类药物[4]以及烟酸类及其衍生物等,以及较新的前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制剂等[5]。与此同时,传统中医药因其毒性副作用小且具有降低血脂效应已成为研究的热点[6]。黄芪(AS-Ⅳ为黄芪提纯的单体)具有益气固表之功效。可降低心脑血管壁的压力,减轻胰岛素抵抗[7]。已被描述用于治疗高脂血症,在高脂血症患者中具有减轻血脂代谢紊乱,保护心肌作用[8,9]。然而,关于AS-Ⅳ的降脂作用、其潜在的分子机制和相关信号通路的数据有限。

    Toll-like 受体(TLRs)信号通路在高脂血症患者中有广泛的跨细胞膜表达[10],不易受环境因素的影响。其中Toll 样受体2(TLR2)和TLR4 与高脂血症有关[11],当TC 和TG 升高时,TLR2 和TLR4 基因表达上调,此外,国内报道OXLDL/Beta2GPI/ANTI-Beta2GPI 复合物可通过TLR4 途径激活人脐静脉内皮细胞(HUVEC),表达与动脉粥样硬化相关的活性分子[12]。结合黄芪临床上的作用和之前的研究结果,作者有理由猜测AS-Ⅳ通过影响TLRs 信号通路参与多靶点降低血脂的过程。黄芪作为祖国中医药对降脂药物的重要补充,还有进一步研究机制的拓展空间。

    HepG2 为人源性肝癌细胞系,由于其保留了与人体生物代谢相关的完整酶,能正常表达mRNA 转录水平和脂质代谢相关的蛋白质水平,因此在评价中药降脂活性方面,被多项研究采用[13]。所以,体外培养的HepG2 细胞系是降脂药物的新药筛选和药效评价的重要模型。基于此,本研究以该细胞模型为干预对象,研究不同浓度的AS-Ⅳ的作用从而来验证作者的假想。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞株 人肝细胞癌细胞株HepG2。

    1.1.2 药物配置 AS-Ⅳ：购自中国药品生物制品检定所(纯度≥98%,中国北京)。配置：将其溶解在二甲基亚砜(DMSO)中,使原液浓度为2 mmol/L。

    1.1.3 主要试验仪器 细胞培养箱(Thermo Fisher Scientific,US)；超净工作台(苏净安,中国)；实时荧光定量PCR 仪(Applied Biosystems 7500 Fast,USA)；移液枪(Eppendorf) ......