李金龙

    单核细胞是机体固有免疫系统的重要组成,作为首道防线维持机体内环境稳态。研究发现,单核细胞具有异质性。根据单核细胞表面标志物的差异,将人类单核细胞分为经典型、中间型、非经典型3 个亚群[1],将小鼠单核细胞分为Ly6Chi和Ly6Clo两个亚群[2]。近年来发现,单核细胞亚群比例失衡和功能失调是众多炎症相关疾病发生发展的重要病理生理学基础之一[3]。2007 年,Nahrendorf 等[4]第一次发现小鼠单核细胞不同亚群的比例在小鼠急性心梗后出现动态变化：Ly6Chi单核细胞比例在小鼠急性心梗后迅速增加,在第 3 d 达到高峰,随后开始下降；后续研究显示,急性心梗后继发的Ly6Chi单核细胞增多与心梗后心室重塑和心功能恶化有关。Zhou 等[5]发现小鼠心肌梗死后第3 d 外周血 Ly6Chi单核细胞增加至70%以上,使用多粘菌素可降低炎症反应及Ly6Chi单核细胞比例。陈羽斐等[6]发现麝香保心丸通过减少循环中炎性单核细胞比例和斑块中巨噬细胞含量,调控动脉粥样硬化斑块的炎症反应。然而,不同研究中报道的Ly6Chi单核细胞亚群的比例不尽相同,对于标本的采集及处理也没有统一的规范。本研究发现,不同取血方式下流式细胞术测定小鼠外周血单核细胞亚群比例差异明显,采用下颌静脉丛取血方式与国内外文献多数报道最为接近。在涉及小鼠单核细胞亚群比例的研究中,应采取一致的采血方式。

    1 材料与方法

    1.1 一般材料 选择18 只6 周龄雄性C57BL/6J 小鼠,购自解放军军事医学科学院实验动物中心。体重在14～17 g 之间,适应性喂养7 d 后进行随机编号。喂养环境：室温25℃左右,每天日光灯给光12 h,相对湿度55%～65%。抗CD11b-PE、抗Ly6G-PerCP/Cy5.5、抗Ly6C-FITC 购自美国Sigma 公司 ......