戴临风 张焕 陈旭 冯月男 张瑶

    糖尿病肾病(DN)是糖尿病的主要微血管并发症,也是许多终末期肾病(ESRD)的主要原因。糖尿病肾病的特征是肾小球滤过率增加, 伴有肾小球内高血压和临床进行性蛋白尿, 随后最终丧失肾功能。足细胞是肾小球滤过屏障的重要组成部分[1], 在糖尿病肾病的肾功能损伤中起着关键作用。足细胞损伤主要表现为足突回缩、脱落以及足细胞相关蛋白nephrin 的异常表达, 导致肾小球基底层增厚、系膜扩张和肾小球硬化等一系列肾脏结构异常[2], 高血糖和高血压的多种干预措施并不能有效降低或逆转肾病的进展, 相当一部分糖尿病患者仍患有进行性和严重的肾损伤。因此,迫切需要开发新的、有效的肾脏保护方法来治疗糖尿病肾病。真武汤出自东汉张仲景的《伤寒论》, 是温阳利水的经典组方, 由附子、白术、茯苓、白芍和生姜组成, 目前, 已有研究表明真武汤能有效治疗糖尿病肾病[3], 但是其治疗机制尚不清楚, 本研究使用诱导的糖尿病肾病大鼠模型来评估真武汤对肾功能和血液流变学的影响及其潜在的因果机制。

    1 材料与方法

    1.1 试验动物 24 只6 周雄性的健康Sprague-Dawley(SD)大鼠(240～280 g), 购自中国科学院上海实验动物中心。所有动物被饲养在温度23～25℃下, 明暗周期12 h,自由饮食、饮水。本研究根据中国科学技术部《实验动物护理和使用指南》的建议进行。

    1.2 试剂 真武汤(附子9 g、生姜9 g、茯苓9 g、白术6 g、白芍9 g)原料由本院中药房提供, 每种药品的凭证标本存放在黑龙江省医院。将生药用蒸馏水浸泡30 min 后再煎附子30 min, 加入其他药物煮1 h 并过滤。将过滤后的液体浓缩液储存于4 ℃下, 使用前用蒸馏水稀释。柠檬酸三钠购自国药集团, STZ 购自Sigma。

    1.3 研究方法 24 只大鼠被分为正常组(8 只)和模型组(16 只), 正常喂养1 周后, 模型组大鼠高脂高糖喂养8 周, 禁食8～12 h 后腹膜内注射给予溶于柠檬酸盐缓冲液(0.1 mol/L, pH=4.5)的STZ 65 mg/kg, 2 周后测定血糖和尿蛋白, 以血糖>16.7 mmol/L、24 h 尿蛋白定量>50 mg 判定为糖尿病肾脏疾病建模成功, 正常组大鼠腹膜内注射等体积的柠檬酸盐缓冲液, 建模成功后将模型组动物分为模型对照组(8 只)和真武汤组(8 只),真武汤组同时给予5.0 g/(kg·d)、10 ml/kg 的真武汤灌胃给药, 模型对照组和正常组给予等体积去离子水灌胃, 连续喂养16 周 ......