2结果

    2.1hIL-10基因的PCR产物电泳分析

    琼脂糖凝胶电泳结果显示,PCR扩增产物均为一条带,对比Marker,大小同预期结果一致(图1)。

    2.2重组质粒的酶切鉴定

    紫外灯下定位切取所需DNA片段凝胶条,重组质粒pIRES2 -EGFP-hIL-10酶切后显示2kb和540bp两个条带(图2)。

    2.3重组质粒测序鉴定

    重组质粒pIRES2-EGFP-hIL-10抽提产物测序结果(图3),经Genebank的序列比对,两重组目的基因序列完全正确。

    2.4重组质粒的结构图(图4)

    2.5紫外分光光度计测定中量抽提质粒确定浓度及纯度(表1)

    3讨论

    白细胞介素10(Interleukin10,IL-10)最初于1989年由Fiorentino等发现,他们证明IL-10由Th2淋巴细胞和单核细胞合成分泌,具有抗炎和抑制多种细胞因子合成的作用,所以称之为细胞因子合成抑制因子(cytokine synthesis inhibiting factor,CSIF)[1] ......