大鼠胰岛细胞和骨髓间充质干细胞联合移植治疗糖尿病小鼠的研究(2)
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1.2.3 小鼠糖尿病模型的建立和胰岛移植 BALB/C小鼠禁食过夜后腹腔注射2%链脲佐菌素180mg/kg,连续2次血糖测定超过16.15mmol/L并稳定2～3d提示造模成功。造模成功后,10%水合氯醛麻醉小鼠,取腹部正中切口,将SD供体大鼠的BMSCs和胰岛细胞悬液经门静脉移植入A组小鼠,B组小鼠仅注射胰岛细胞,C组小鼠注射生理盐水,每只大鼠收获的细胞对应一只小鼠。移植完毕后,全层缝合切口,应用抗生素预防感染。
1.2.4 移植效果的检测 分别在移植后1d,5d,15d后,由小鼠尾切口取血,用全自动血糖仪测定血糖。
1.3 统计学方法
所有数据均采用(均数±标准差)表示,用SPSS 17.0统计软件包进行统计学处理。应用方差分析SNK法,检验水准α=0.05,P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 BMSCs的形态
经密度梯度离心的BMSCs形态比较均一,刚接种时呈悬浮生长,第二天大部已经贴壁,呈梭形,纺锤形,巢状生长,如封三图1所见。
2.2 胰岛细胞的形态
经胶原酶消化后的大鼠胰腺组织的悬液在倒置显微镜下观察,见有大小不一,圆形或卵圆形的淡黄色细胞团和散在细胞,用双硫腙染色后染成红色或猩红色的细胞团为典型胰岛,胰岛直径大小不一,胰岛内胰岛细胞数量不等,外分泌组织不着色,如封三图2所见。
2.3 移植后血糖水平观察(表1)
各组数据经Levene检验,方差符合齐性(P<0.05);不同组血糖控制水平的比较,三组间进行方差分析,F=7.97,P<0.05,认为有统计学意义,A组与B组对比,即联合移植组与单独胰岛细胞移植组比较,有统计学意义(P<0 ......
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