内毒素对鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞钠泵的影响及机制
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陈芳 连庆泉 金胜威 温州医学院附属第二医院麻醉科;
【摘要】目的观察内毒素对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)钠泵的影响。方法 ATⅡ细胞成功分离纯化后随机分为两组:①对照组(PBS);②LPS组(1μg/mL)药物干预4 h后用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测ATⅡ细胞上钠泵α1、β1亚基mRNA的表达;免疫组化法检测钠泵α1、β1亚基蛋白的表达;用高效液相法测定细胞ATP、ADP、AMP和腺嘌呤核苷酸总量(TAN),间接测得钠泵的活性。结果 RT-PCR结果显示:LPS组α1、β1亚基的mRNA表达较对照组明显降低(P0.05);酶活性检测结果显示:LPS组钠泵活性较对照组明显增高(P0.05);免疫组化结果显示:ATⅡ细胞上钠泵α1、β1亚基蛋白均有表达,各组亚基蛋白的表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论内毒素能下调ATⅡ细胞钠泵α1、β1亚基的mRNA表达,应激调节钠泵活性,但对蛋白表达无明显影响,提示钠泵的变化可能与内毒素性肺损伤有关。
【关键词】 钠泵 肺泡Ⅱ型上皮细胞 内毒素
【基金】国家自然科学基金资助项目(81070061) 浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目
【分类号】R563.8
内毒素性急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床常见危重病症,病死率极高,其主要病理特征是肺组织大量中性粒细胞浸润和肺泡-毛细血管屏障损伤所致的肺水肿[1,2]。肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells,ATⅡ)上的钠泵在肺水清除中起着重要作用。本实
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[摘要] 目的 观察内毒素对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)钠泵的影响。 方法 ATⅡ细胞成功分离纯化后随机分为两组：①对照组(PBS)；②LPS组(1 μg/mL)药物干预4 h后用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测ATⅡ细胞上钠泵α1、β1亚基mRNA的表达；免疫组化法检测钠泵α1、β1亚基蛋白的表达；用高效液相法测定细胞ATP、ADP、AMP和腺嘌呤核苷酸总量(TAN)，间接测得钠泵的活性。 结果 RT-PCR结果显示：LPS组α1、β1亚基的mRNA表达较对照组明显降低(P < 0.05)；酶活性检测结果显示：LPS组钠泵活性较对照组明显增高(P < 0.05)；免疫组化结果显示：ATⅡ细胞上钠泵α1、β1亚基蛋白均有表达，各组亚基蛋白的表达量差异无统计学意义(P > 0.05)。 结论 内毒素能下调ATⅡ细胞钠泵α1、β1亚基的mRNA表达，应激调节钠泵活性，但对蛋白表达无明显影响，提示钠泵的变化可能与内毒素性肺损伤有关。
[关键词] 钠泵；肺泡Ⅱ型上皮细胞；内毒素
[中图分类号] R332；R563 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2012)31-0004-04
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