EGFR、P16、Ki67和P53在宫颈鳞状上皮内瘤变和宫颈鳞状细胞癌中表达的临床意义(1)
[摘要] 目的 探讨EGFR、P16、Ki67和P53在宫颈病变组织中的表达及临床意义。 方法 应用免疫组化SP法检测84例宫颈鳞状上皮内瘤变(CIN)和30例宫颈鳞癌中EGFR、P16、Ki67和P53的表达，另选取20例正常宫颈组织作为对照。 结果 EGFR、P16、Ki67和P53在正常宫颈组织中阳性率分别为10.00%、0、5.00%及5.00%；在CIN中阳性率分别为33.33%、82.14%、54.76%及47.62%；在宫颈鳞癌中阳性率分别为56.67%、100.00%、86.67%及76.67%，差异均有统计学意义(P < 0.05)。EGFR、P16、Ki67和P53表达强度均随宫颈病变的进展而增加，表达均有统计学意义(P < 0.05)。EGFR、P16、Ki67和 P53表达在CIN和鳞癌中两两比较均呈显著性正相关(P < 0.05)。结论 EGFR、P16、Ki67和P53可能参与了宫颈癌病变的发生及发展，联合检测四者可作为CIN分级与鳞癌诊断的重要参考指标。
[关键词] 宫颈上皮内瘤变；宫颈鳞癌；EGFR；P16；Ki67；P53；免疫组织化学
, http://www.100md.com
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2013)02-0087-04
宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，最常见的组织学类型是鳞状细胞癌，其发病是从宫颈鳞状上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)到浸润性癌的一个连续发展的过程。由于宫颈癌具有发展慢、发病隐匿的特点，早期可无明显症状，因此在宫颈癌前病变阶段找到预示病变进展的标志物对宫颈癌防治意义重大，是宫颈癌得以早期诊断进而提高治愈率和生存率的关键。
近年来，国内外研究表明，宫颈上皮肿瘤的发生、发展及预后与多种基因蛋白的变化密切相关。表皮生长因子受体(EGFR)是蛋白酪氨酸激酶生长因子受体家族的一员，是一种相对分子质量为170 000的跨膜糖蛋白，其过表达与肿瘤的发生发展密切相关。P16是一种新型抑癌基因，参与了肿瘤发生发展的周期调控。Ki67是一种与增殖细胞相关的核抗原，是细胞增殖标记物，反映肿瘤的增殖活性。P53基因突变是人类恶性肿瘤最常见的一种分子改变。
, 百拇医药
本研究联合检测EGFR、P16、Ki67和 P53在宫颈病变中的表达和意义，旨在探讨四者在宫颈病变发生发展中的作用以及可能的诊断价值和治疗意义。
1 材料与方法
1.1 材料
所有标本均取自于我院2008年6月～2011年3月宫颈活检/锥切及手术切除标本，共114例，其中CIN 84例(CINⅠ24例，CINⅡ32例，CINⅢ28例)，宫颈鳞癌30例，参照2003版WHO肿瘤病理学及遗传学分类：女性生殖器官肿瘤的宫颈肿瘤组织学分类标准。所有患者术前均未进行放、化疗和免疫治疗；另选取同院同期相应的20例正常宫颈组织作为对照。所有标本均经10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，4 μm切片。
1.2 方法
1.2.1 方法 鼠抗人EGFR单克隆抗体、鼠抗人P16单克隆抗体、鼠抗人Ki67单克隆抗体、鼠抗人P53单克隆抗体及SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。采用免疫组化SP法，以PBS代替一抗为阴性对照，以已知阳性片作为阳性对照。
, http://www.100md.com
1.2.2 结果判断 EGFR阳性定位于细胞膜或细胞浆，P16阳性定位在细胞核和(或)胞浆，Ki67和P53阳性定位在细胞核，凡出现黄色或棕黄色颗粒为阳性细胞，以无阳性瘤细胞或阳性细胞数<10%为阴性；阳性瘤细胞>10%为阳性。其中按阳性细胞占肿瘤细胞百分比分为3个等级：阳性瘤细胞数占10%～25%为(+)，占25%～50%为(++)，>50%为(+++)。
1.3 统计学处理
应用SPSS 17.0统计软件进行χ2检验，以P﹤0.05为有显著性差异。
2结果
2.1 EGFR、P16、Ki67和 P53的表达
EGFR、P16、Ki67和P53在正常宫颈组织中阳性率分别为10.00%、0、5.00%及5.00%；在CIN中阳性率分别为33.33%、82.14%、54.76%及47.62%；在宫颈鳞癌中阳性率分别为56.67%、100.00%、86.67%及76.67%。四种蛋白在正常组、CIN组与鳞癌组相比较，差异均有统计学意义(P < 0.05)。见图1～4及表1。
, 百拇医药
2.2 EGFR、P16、Ki67和 P53在不同宫颈鳞状上皮内瘤变分级中的表达
EGFR在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为12.5%、37.5%和46.43%，在CINⅠ与CINⅡ，CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。P16在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为62.5%、81.25%和100%，在CINⅡ和CINⅢ，CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。Ki67在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为41.67%、50%和71.43%，在CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。P53在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为29.17%、46.88%和64.29%，在CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。见表2。
2.3 EGFR、P16、Ki67和 P53在宫颈病变中表达的相关性
Spearman相关检验显示，在CIN和鳞癌中EGFR、P16、Ki67和 P53表达两两比较均呈显著性正相关(r1 = 0.208，r2 = 0.245，r3 = 0.221，r4 = 0.241，r5 = 0.224，r6 = 0.227，P <0.05)。
, http://www.100md.com(丛玲华 戴珍珍 方来福 王静 李萍 钟国平)
[关键词] 宫颈上皮内瘤变；宫颈鳞癌；EGFR；P16；Ki67；P53；免疫组织化学
, http://www.100md.com
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2013)02-0087-04
宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，最常见的组织学类型是鳞状细胞癌，其发病是从宫颈鳞状上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)到浸润性癌的一个连续发展的过程。由于宫颈癌具有发展慢、发病隐匿的特点，早期可无明显症状，因此在宫颈癌前病变阶段找到预示病变进展的标志物对宫颈癌防治意义重大，是宫颈癌得以早期诊断进而提高治愈率和生存率的关键。
近年来，国内外研究表明，宫颈上皮肿瘤的发生、发展及预后与多种基因蛋白的变化密切相关。表皮生长因子受体(EGFR)是蛋白酪氨酸激酶生长因子受体家族的一员，是一种相对分子质量为170 000的跨膜糖蛋白，其过表达与肿瘤的发生发展密切相关。P16是一种新型抑癌基因，参与了肿瘤发生发展的周期调控。Ki67是一种与增殖细胞相关的核抗原，是细胞增殖标记物，反映肿瘤的增殖活性。P53基因突变是人类恶性肿瘤最常见的一种分子改变。
, 百拇医药
本研究联合检测EGFR、P16、Ki67和 P53在宫颈病变中的表达和意义，旨在探讨四者在宫颈病变发生发展中的作用以及可能的诊断价值和治疗意义。
1 材料与方法
1.1 材料
所有标本均取自于我院2008年6月～2011年3月宫颈活检/锥切及手术切除标本，共114例，其中CIN 84例(CINⅠ24例，CINⅡ32例，CINⅢ28例)，宫颈鳞癌30例，参照2003版WHO肿瘤病理学及遗传学分类：女性生殖器官肿瘤的宫颈肿瘤组织学分类标准。所有患者术前均未进行放、化疗和免疫治疗；另选取同院同期相应的20例正常宫颈组织作为对照。所有标本均经10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，4 μm切片。
1.2 方法
1.2.1 方法 鼠抗人EGFR单克隆抗体、鼠抗人P16单克隆抗体、鼠抗人Ki67单克隆抗体、鼠抗人P53单克隆抗体及SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。采用免疫组化SP法，以PBS代替一抗为阴性对照，以已知阳性片作为阳性对照。
, http://www.100md.com
1.2.2 结果判断 EGFR阳性定位于细胞膜或细胞浆，P16阳性定位在细胞核和(或)胞浆，Ki67和P53阳性定位在细胞核，凡出现黄色或棕黄色颗粒为阳性细胞，以无阳性瘤细胞或阳性细胞数<10%为阴性；阳性瘤细胞>10%为阳性。其中按阳性细胞占肿瘤细胞百分比分为3个等级：阳性瘤细胞数占10%～25%为(+)，占25%～50%为(++)，>50%为(+++)。
1.3 统计学处理
应用SPSS 17.0统计软件进行χ2检验，以P﹤0.05为有显著性差异。
2结果
2.1 EGFR、P16、Ki67和 P53的表达
EGFR、P16、Ki67和P53在正常宫颈组织中阳性率分别为10.00%、0、5.00%及5.00%；在CIN中阳性率分别为33.33%、82.14%、54.76%及47.62%；在宫颈鳞癌中阳性率分别为56.67%、100.00%、86.67%及76.67%。四种蛋白在正常组、CIN组与鳞癌组相比较，差异均有统计学意义(P < 0.05)。见图1～4及表1。
, 百拇医药
2.2 EGFR、P16、Ki67和 P53在不同宫颈鳞状上皮内瘤变分级中的表达
EGFR在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为12.5%、37.5%和46.43%，在CINⅠ与CINⅡ，CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。P16在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为62.5%、81.25%和100%，在CINⅡ和CINⅢ，CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。Ki67在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为41.67%、50%和71.43%，在CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。P53在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中阳性率分别为29.17%、46.88%和64.29%，在CINⅠ和CINⅢ中表达差异有统计学意义(P < 0.05)。见表2。
2.3 EGFR、P16、Ki67和 P53在宫颈病变中表达的相关性
Spearman相关检验显示，在CIN和鳞癌中EGFR、P16、Ki67和 P53表达两两比较均呈显著性正相关(r1 = 0.208，r2 = 0.245，r3 = 0.221，r4 = 0.241，r5 = 0.224，r6 = 0.227，P <0.05)。
, http://www.100md.com(丛玲华 戴珍珍 方来福 王静 李萍 钟国平)