细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用(2)
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1资料与方法
1.1一般资料
选择本院2011年6月～2013年6月呼吸内科门诊所接收的60例胸腔积液患者。其中，男36例，女24例，年龄20～72岁，平均(47.6±15.7)岁。所有患者送检标本均为胸腔积液，每例患者均进行细胞涂片和细胞块切片制作。所有患者经过临床特征加影像学检查均诊断为恶性胸腔积液，本研究均征得患者及其家属同意，并签署试验意见书。
1.2方法
1.2.1标本制备 所有细胞涂片和细胞块标本均取10 mL，分为3～5个管，使用离心机分离沉渣后制成HE涂片，离心率为3 000 r/min，分离时间为10 min。然后将分离后剩下的沉渣使用试镜纸进行包裹，固定在10%福尔马林中性固定液中，经过常规的处理后制备成细胞蜡块，然后进行细胞连续切片，切片厚度为3～4 μm。所有细胞涂片和细胞块切片分别进行HE染色和免疫组化染色。
1.2.2 HE染色标本观察[6] 所有观察过程由两位具有高级职称的病理医生进行观察。根据标本中的细胞形态、黏附性以及核不典型性，如果出现反应性增生间皮细胞，细胞的弥散性好，无不典型性，比较温和则为良性；如果细胞成团，核具有严重不典型性，细胞形态严重不温和则为恶性；如果细胞弥散，核中-重度不典型性，或者是细胞成团，核中-轻度不典型性则为不能肯定。
1.2.3免疫组化染色标本观察[7] 使用S-P法，Maxvision试剂盒，DAB显色试剂；抗体选择为CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA、Calretinin、WT-1，CK5/6、Desmin。所有操作按照说明书进行。判断标准为：CK7、BerEP4、CEA、MOC-31、CK5/6、Desmin细胞质染色呈棕黄色为阳性 ......
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