鲍小招 范广民 吴忠明 吴忠标 毛祺琦 曾爱平 屈宏斐

    1.温州医学院附属温岭市医院泌尿科，浙江温岭317500；2.浙江省台州市中心医院病理科，浙江台州317000；3.浙江大学附属第一医院泌尿科，浙江杭州310000；4.温州医学院附属温岭市医院病理科，浙江温岭317500

    缺氧诱导因子-1α在前列腺癌中的表达及意义

    鲍小招1范广民2吴忠明1吴忠标1毛祺琦3曾爱平4屈宏斐1

    1.温州医学院附属温岭市医院泌尿科，浙江温岭317500；2.浙江省台州市中心医院病理科，浙江台州317000；3.浙江大学附属第一医院泌尿科，浙江杭州310000；4.温州医学院附属温岭市医院病理科，浙江温岭317500

    目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在前列腺癌发病机制中的作用。方法各取50例石蜡包埋的前列腺癌组织(前列腺癌组)和良性前列腺增生组织(良性前列腺增生组)，采用免疫组化法测定两组组织中HIF-1α蛋白的表达。结果前列腺癌组HIF-1α蛋白的阳性表达率和阳性表达强度均显著高于良性前列腺增生组(依次为：74.00%vs 12.00%；OD值为0.17±0.04 vs 0.14±0.03)(P1 资料与方法

    1.1一般资料

    选择台州市各医院2010年5月～2014年2月的前列腺癌住院手术患者50例(前列腺癌组)，年龄59～82岁(平均71岁)，标本均经术后病理确诊。并以良性前列腺增生患者50例(良性前列腺增生组)作对照，年龄53～81岁(平均69岁)，均经尿道前列腺电切除术留取增生前列腺组织。两组组织标本经10%甲醛固定保存，两组患者年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。

    1.2试剂

    鼠抗人HIF-1α单克隆抗体(生产批号ZM-0356)和二抗羊抗鼠免疫组化试剂盒及DAB底物显色剂均购自福州迈新生物技术有限公司。HIF-1α抗体的工作浓度为1∶100。

    1.3HIF-1α蛋白的检测

    采用SP法进行检测，主要步骤如下：标本经10%甲醛固定、浓度梯度的乙醇脱水、石蜡包埋、4 μm厚度切片、脱蜡、抗原修复，3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，兔血清封闭，滴加一抗4℃过夜、二抗及链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶复合物，DAB显色、复染、封固。PBS代替一抗作为阴性对照。阳性表达细胞为综黄色，表达定位在细胞浆和(或)细胞核。每张切片于随机选择5个视野(200倍)，细胞阳性率计数方法为：无着色为(-)，<30%记为+，30%～70%记为++，>70%记为+++；并对阳性细胞采用Image Pro-plus 5.1免疫组化图像分析系统进行灰度扫描来表达其平均吸光强度 ......