1.2 SGC7901细胞的培养

    荧光素酶标记的SGC7901细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中，37℃、5%CO2孵育箱中培养至贴壁，3 d后用0.25%胰酶消化传代培养一次。

    1.3稳定表达CCR7的荧光素酶-SGC7901胃癌细胞株的建立

    首先采用淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞并提取总RNA，在NCBI基因库中获取CCR7 基因的CDS序列并设计带有酶切位点的引物，由上海生工有限公司合成，使用高保真pfu聚合酶扩增CCR7基因的序列，并在1.5%琼脂糖凝胶进行电泳。将PCR反应电泳回收产物和pLVX-Puro质粒分别酶切进行电泳并回收，T4连接酶连接，使CCR7与pLVX-Puro质粒连接，将连接产物转化，LB固体培养基培养，提取pLVX-Puro-CCR7重组质粒。SGC7901胃癌细胞计数约为5×105接种于6孔板中，于37℃、5%CO2培养箱中6 h后使细胞融合度达到75% ......