莪术醇β—环糊精包合物对Bel—7404肝癌细胞体外抑瘤作用和细胞周期影响的研究(2)
1 材料与方法1.1 试剂来源
莪术醇(中国药品生物制品检定所);MTT(美国Invitrogen公司);β-环糊精(天津市光复精细化工研究所);DMEM培养基(美国Gibco公司);兔抗人p21单克隆抗体(美国CST公司);兔抗人p27单克隆抗体(美国CST公司);胎牛血清(美国Gibco公司);Annexin V-FITC-PI双染细胞凋亡检测试剂盒(南京凯基生物科技发展公司)。
1.2 细胞培养
Bel-7404人肝癌细胞株购于美国ATCC细胞库,细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基,在37℃、5%CO2条件下传代培养。取对数生长期状态良好的细胞进行以下实验。
1.3 检测指标及方法
1.3.1 MTT法测定肝癌细胞增殖情况 取对数生长期的细胞以104个细胞/孔的密度接种于96孔培养板中。培养24 h后,分别加入终浓度为25、50、100 mg/L莪术醇β-环糊精包合物培养液100 μL ......
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