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编号:12559237
鼠源性HSP70、GM—CSF双修饰前列腺癌全细胞疫苗的建立与鉴定(2)
http://www.100md.com 2015年7月5日 《中国现代医生》 2015年第19期
     1.2.4 慢病毒感染RM-1细胞 取对数生长的RM-1细胞,以2×105/孔接种于6孔板中,37℃,5% CO2的培养箱中培养,待细胞融合度达到30%~50%时,加入慢病毒感染液进行实验。实验分成5组,分别为CON组(空白对照组)、NC组(空病毒载体感染组)、pLenti6.3_ MCS_Hspa1a_cMyc病毒载体感染组、pLenti6.3_MCS_ CSf2_V5病毒载体感染组、pLenti6.3_MCS_Hspa1a_ cMyc/pLenti6.3_MCS_CSf2_V5病毒载体共感染组。预实验明确pLenti6.3_MCS_Hspa1a_cMyc病毒载体感染组感染细胞的最佳感染复数(multiplicity of infection, MOI)值为8,pLenti6.3_MCS_CSf2_V5病毒载体感染组最佳MOI值为10。根据预实验最佳MOI值,在RM-1细胞中加入适量病毒,12 h后观察细胞状态:如果没有明显的细胞毒性作用,继续培养24 h后更换培养基;如果有明显的细胞毒性作用 ......
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