莱菔硫烷协同氯化锂对创伤性脑损伤大鼠神经保护作用研究(2)
1.4.3 脑组织HE染色 各组大鼠分别于术后7 d随机抽取5只大鼠,按照上述方法处死,取其脑组织,取出小脑以及低位脑干,以损伤中心为标准,冠状位切开脑组织,然后立即浸入福尔马林溶液当中固定48 h,常规石蜡包埋。HE染色步骤:石蜡切片(厚度为4 μm)→二甲苯脱蜡→梯度酒精脱水→蒸馏水洗→苏木素染细胞核→蒸馏水洗→盐酸酒精分化→氨水细胞核返蓝→伊红染细胞浆→梯度酒精脱水→二甲苯透明→封片→观察、拍照。1.4.4 脑组织SOD活性、IL-6、TNF-α以及MDA含量测定 术后7 d按照上述方法每组处死5只大鼠,取其脑组织,用生理盐水冲洗后,吸取表面水分,取打击灶为中心的脑组织约220 g,用电子天平精确测量重量后加入约9倍体积的PBS,制作成损伤大脑皮层的匀浆,并记录匀浆总体积(mL)。将其离心20 min(4000 r/min),取其上清液,分装后置于-80℃冰箱内备用检测。各组大鼠脑组织SOD活性、IL-6、TNF-α以及MDA含量测定参照试剂盒使用说明书进行。
1.5 统计学分析
采用SPSS 22.0统计学软件对本研究数据结果进行统计分析,计量资料以(x±s)表示,两组比较采用t检验,多组比较采用方差分析,检验水平为α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义 ......
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