1.2 方法

    1.2.1 RNA的提取和实时定量RT-PCR检测 利用Trizol(Invitrogen)提取腺样囊性癌和正常腺体组织中的总RNA，实时定量RT-PCR(qRT-PCR)按照TaKaRa的SYBR green试剂盒说明说进行操作。Runx3及GAPDH引物由上海生工公司设计并生产。Runx3的上游引物为：5’-CACTGGCGCTGCAACAAGA-3’，Runx3的下游引物为：5’-CACGAAGCGAAGGTCGTTGA-3’。GAPDH的上游引物为：5’-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3’，GAPDH的下游引物为：5’-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3’。

    1.2.2 免疫组织化学检测 采用超敏S-P法染色，一抗为兔抗人Runx3多克隆抗体(Abcam，美国)，抗兔二抗试剂盒购自福州迈新公司，按试剂盒说明书进行免疫组织化学操作，石蜡组织切片经过脱蜡、水化，3%过氧化氢室温孵育10 min，0.01 M枸橼酸盐缓冲液高压锅抗原修复，正常山羊血清封闭30 min ......