病理活检组织自动脱水方法及改进(1)
[摘要] 目的 保证活检组织标本脱水和浸蜡的质量，减少试剂的损耗，制作优质的石蜡组织块。 方法 2013年11月～2015年7月使用全自动脱水机的脱水过程中，通过试剂更换和管道清洗，以及对脱水机使用、维护、保养和常见故障排除等方面进行探讨。 结果 活检标本处理质量高，HE 染色后形态清晰。维持了组织原有的形态和最接近细胞生存状态中的蛋白质和DNA，为免疫组织化学、特殊染色、分子病理等技术方法奠定基础。 结论 脱水是病理技术中的重要环节，需要技术人员高度的责任心，并通过观察总结出一套适合本科室工作的脱水方法和流程。
[关键词] 病理制片；活检标本；固定液；脱水试剂；HE染色
[中图分类号] R361.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2015)25-0109-03
Automatic dehydration method and improvement of pathological biopsy tissue
LI Zizi
Department of Pathology， the Fifth Hospital Affiliated to SunYat-sen University， Zhuhai 519000， China
[Abstract] Objective To ensure the quality of dehydrated and paraffin wax， reduce the loss of the reagent， and make the high quality paraffin block. Methods From November 2013 to July 2015， the dehydration process of the automatic dehydration machine， the use of reagent and pipeline cleaning to discuss the use， maintenance， maintenance and common trouble shooting of the dewatering machine. Results The quality of the biopsy specimen was improved， and the morphology of HE staining was clear. To maintain the original form of the organization and the most close to the cell viability of the protein and DNA， as the immune tissue chemistry， special staining， molecular pathology and lay the foundation for other technical methods. Conclusion Dehydration is an important part in the pathology technology， it needs a high degree of responsibility， and a summary a practical system for this work.
[Key words] Pathological section； Biopsy； Formalin； Dehydrator； HE stain
随着医院门诊及手术量的增加，越来越多的医生会对患者进行活体组织检查，希望能通过此项检查给予疾病明确的诊断，并对于后续的治疗给予正确的方向。随着病理技术的进一步发展，对组织标本的处理要求日益提高，其中包括免疫组织化学检查以及个性化、私人订制的分子病理检查。目前也是在脱水后的石蜡包埋标本上进行制作，因此保持活体组织的形态、保存细胞中的蛋白质和DNA显得尤其重要。全自动密闭式组织脱水机是目前广大医院脱水的基本设备，是病理技术工作的重要组成部分。高质量的处理标本，减少故障率，维持脱水机的正常运转，以至于每日取材标本都能按时制片，最终能才够确保病理报告的按时发出，因此显得尤为重要[1]。
组织脱水过程是一个物理化学变化的过程，乙醇作为脱水剂，是因为乙醇易溶于水，能与水以任何比例混合。组织浸泡在乙醇后，组织内水分被乙醇所替代。组织在梯度酒精内完全脱水后，通过二甲苯作为媒介，置换出组织中的乙醇，然后被融化的石蜡所填充。
1 资料与方法
1.1 材料与仪器
我院活检标本和外科手术标本。仪器：Thermofisher Excelsior ES型全自动密闭式组织脱水机，每台附带不锈钢脱水篮1只，可容纳300个包埋盒，塑料包埋盒为国内产品。我们科室在2013～2015年购置了Thermofisher Excelsior ES脱水机，使用过程中在科学理论指导下，联系实际，总结出一套适合广东气候和本科室工作程序的脱水程序。
1.2 方法
标本取材后放入脱水机，总时间为13 h。该脱水程序，适合内镜标本、皮肤标本以及手术标本。脱水设置程序为4%中性甲醛Ⅰ30 min、4%中性甲醛Ⅱ45 min、70%乙醇45 min、80%乙醇45 min、95%乙醇60 min、95%乙醇75 min、无水乙醇Ⅰ90 min、无水乙醇Ⅱ90 min、二甲苯Ⅰ20 min、二甲苯Ⅱ20 min、二甲苯Ⅲ20 min、石蜡Ⅰ60 min、石蜡Ⅱ90 min、石蜡Ⅲ90 min[2-4]。
1.2.1 初次固定 采用10%中性缓冲福尔马林浸泡标本。其使用广泛，易于配制，穿透速度快，组织硬化程度小。保存细胞的基本形态，维持接近细胞生活状态的蛋白质和DNA且细胞核和细胞质的微细部分均保存良好，也可进行免疫组化染色。我们科室在收到当天的门诊活检标本或手术标本均固定至次日，待标本充分固定后再取材。, 百拇医药(李孜孜)
[关键词] 病理制片；活检标本；固定液；脱水试剂；HE染色
[中图分类号] R361.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2015)25-0109-03
Automatic dehydration method and improvement of pathological biopsy tissue
LI Zizi
Department of Pathology， the Fifth Hospital Affiliated to SunYat-sen University， Zhuhai 519000， China
[Abstract] Objective To ensure the quality of dehydrated and paraffin wax， reduce the loss of the reagent， and make the high quality paraffin block. Methods From November 2013 to July 2015， the dehydration process of the automatic dehydration machine， the use of reagent and pipeline cleaning to discuss the use， maintenance， maintenance and common trouble shooting of the dewatering machine. Results The quality of the biopsy specimen was improved， and the morphology of HE staining was clear. To maintain the original form of the organization and the most close to the cell viability of the protein and DNA， as the immune tissue chemistry， special staining， molecular pathology and lay the foundation for other technical methods. Conclusion Dehydration is an important part in the pathology technology， it needs a high degree of responsibility， and a summary a practical system for this work.
[Key words] Pathological section； Biopsy； Formalin； Dehydrator； HE stain
随着医院门诊及手术量的增加，越来越多的医生会对患者进行活体组织检查，希望能通过此项检查给予疾病明确的诊断，并对于后续的治疗给予正确的方向。随着病理技术的进一步发展，对组织标本的处理要求日益提高，其中包括免疫组织化学检查以及个性化、私人订制的分子病理检查。目前也是在脱水后的石蜡包埋标本上进行制作，因此保持活体组织的形态、保存细胞中的蛋白质和DNA显得尤其重要。全自动密闭式组织脱水机是目前广大医院脱水的基本设备，是病理技术工作的重要组成部分。高质量的处理标本，减少故障率，维持脱水机的正常运转，以至于每日取材标本都能按时制片，最终能才够确保病理报告的按时发出，因此显得尤为重要[1]。
组织脱水过程是一个物理化学变化的过程，乙醇作为脱水剂，是因为乙醇易溶于水，能与水以任何比例混合。组织浸泡在乙醇后，组织内水分被乙醇所替代。组织在梯度酒精内完全脱水后，通过二甲苯作为媒介，置换出组织中的乙醇，然后被融化的石蜡所填充。
1 资料与方法
1.1 材料与仪器
我院活检标本和外科手术标本。仪器：Thermofisher Excelsior ES型全自动密闭式组织脱水机，每台附带不锈钢脱水篮1只，可容纳300个包埋盒，塑料包埋盒为国内产品。我们科室在2013～2015年购置了Thermofisher Excelsior ES脱水机，使用过程中在科学理论指导下，联系实际，总结出一套适合广东气候和本科室工作程序的脱水程序。
1.2 方法
标本取材后放入脱水机，总时间为13 h。该脱水程序，适合内镜标本、皮肤标本以及手术标本。脱水设置程序为4%中性甲醛Ⅰ30 min、4%中性甲醛Ⅱ45 min、70%乙醇45 min、80%乙醇45 min、95%乙醇60 min、95%乙醇75 min、无水乙醇Ⅰ90 min、无水乙醇Ⅱ90 min、二甲苯Ⅰ20 min、二甲苯Ⅱ20 min、二甲苯Ⅲ20 min、石蜡Ⅰ60 min、石蜡Ⅱ90 min、石蜡Ⅲ90 min[2-4]。
1.2.1 初次固定 采用10%中性缓冲福尔马林浸泡标本。其使用广泛，易于配制，穿透速度快，组织硬化程度小。保存细胞的基本形态，维持接近细胞生活状态的蛋白质和DNA且细胞核和细胞质的微细部分均保存良好，也可进行免疫组化染色。我们科室在收到当天的门诊活检标本或手术标本均固定至次日，待标本充分固定后再取材。, 百拇医药(李孜孜)