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编号:12731791
流式细胞术分析比较癌症患者新鲜和冻存复苏后外周血淋巴细胞亚群的实验研究(2)
http://www.100md.com 2015年10月15日 《中国现代医生》 2015年第29期
     1 材料与方法

    1.1 实验材料

    IMDM培养基(Gibco)、DMSO (Gibco)、胎牛血清 (Hyclone)、CD45-FITC/CD4-RD1/CD8-ECD/CD3-PC5 (6607013)、CD3-FITC/CD16+56-PE(A07735)、CD4-FITC(A07750)、CD25-PE (A07774),OptiLyse@C Lysis Solution(A11895)均为Beckman Coulter公司产品。

    1.2 标本采集和处理

    血液样本来自吉林省肿瘤医院于2014年6~12月的住院患者,取经诊断为肺腺癌的患者静脉血2 mL,EDTA(乙二胺四乙酸)钾盐抗凝,立即送检。实验室做好样本的登记和编号,在流式试管内加相应抗体10 μL,加入待测血100 μL,混匀后室温避光20~30 min充分反应。加OptiLyse@C Lysis Solution震荡混匀,加磷酸盐缓冲液和甲醛固定液,震荡混匀后上机检测。采用Beckman Coulter Epics XL-MCL流式细胞仪检测外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD16+56+、CD3-CD16+56+、CD4+ CD25+细胞的百分率 ......
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