1.4.2 标本收集和切片制作 实验动物均于脊髓损伤后第1、2、3、4周时打开胸腔，经心脏灌注缓冲液冲洗组织内血液。取出脊髓组织，在4%多聚甲醛中固定约6 h，以30%蔗糖溶液浸泡，冰冻切片，厚度20 μm。

    1.5 评价指标

    1.5.1 后肢运动神经功能 评分用BBB评分法[4]于术后1 d、3 d、1周、2周、3周、4周观察大鼠双后肢运动功能，并按后肢全瘫(0分)至后肢运动完全正常(21分)记录分数。

    1.5.2 NGF蛋白表达的免疫组织化学方法及步骤 免疫组织化学染色严格按照试剂盒操作，每只大鼠随机5张切片。观察与计数方法：以胞质或胞核中出现棕黄色颗粒为阳性，以Image-Pro Plus 6.0软件计算每张切片的阳性细胞数，该标本的阳性细胞数为每张片的平均阳性细胞个数。

    1.6 统计学分析

    采用SPSS20.0统计软件，计量资料用(x±s)表示，进行单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 行为学观察

    术后脊髓损伤的大鼠均呈现双后肢完全瘫痪 ......