冯金发 戴 猛 张浩梁 金龙 杨 勇 杨泽利 孙 侃

    黑龙江省医院普外科，黑龙江哈尔滨150000

    RNA干扰Fbxw8基因对人结肠癌细胞增殖能力的影响

    冯金发 戴 猛 张浩梁 金龙 杨 勇 杨泽利 孙 侃▲

    黑龙江省医院普外科，黑龙江哈尔滨150000

    目的探讨靶向抑制Fbxw8基因对结肠癌SW 480细胞增殖的影响。方法RNA干扰(RNAi)方法下调SW 480细胞中Fbxw8的表达。通过Real-time PCR、western blotting方法分别检测Fbxw8mRNA和蛋白表达变化；CCK-8、细胞克隆形成实验及BrdU掺入法检测下调Fbxw8对SW 480细胞的增殖、DNA合成能力的影响。Western blotting检测下调Fbxw8对SW480细胞增殖相关基因表达的影响。结果Fbxw8 siRNAs显著降低SW480细胞Fbxw8 mRNA和蛋白的表达，CCK-8结果显示：与对照组(0.78±0.11)相比，两对Fbxw8 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.46±0.07、0.49±0.03，P<0.05)；细胞克隆形成实验显示与对照组相比，Fbxw8 siRNAs组细胞的克隆形成数目及大小显著降低。BrdU掺入实验显示与对照组(0.83±0.12)相比，Fbxw8 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.47±0.06、0.56±0.09，P<0.05)；同时伴随着细胞周期蛋白cyclin E的下调而p27的表达升高。结论Fbxw8 siR NA可以通过下调cyclin E、上调p27的表达而有效抑制SW480细胞增殖，为结肠癌的基因治疗提供新的候选靶点。

    结肠癌；SW 480；Fbxw8；细胞增殖；Cyclin E；p27

    结肠癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，每年在世界范围内占新发肿瘤的第3位[1]。近年来，我国的发病率也呈逐年上升的趋势[2]。大多数结肠癌患者就诊时已有转移病灶，术后必须辅以化疗。但迄今为止，由于结肠癌细胞对化疗药物易产生耐药性，而使大多数化疗药物的疗效有限。因此临床上急需寻找结肠癌基因治疗的靶点。肿瘤细胞的恶性增殖在癌症进程过程中具有重要作用，而结肠癌细胞的恶性增殖机制目前尚不完全明确[3]。Fbxw8作为F-box蛋白，可与Skp1、Cullin7及ROC1形成CUL7/Fbxw8 E3连接酶，特异性识别并降解胰岛素受体底物-1(IRS-1)，从而成为调控生长的重要分子[4-7]。研究表明，下调Fbxw8表达可显著抑制绒癌细胞JEG-3及胰腺癌细胞的增殖功能 ......