过表达CCR9对SW480结肠癌细胞侵袭的影响(2)
1.2 试剂BamH I和 EcoR I限制性内切酶(货号:1605和1040A,日本Takara公司);质粒抽提试剂盒(货号:B518191,上海生工公司);胎牛血清(货号:SH300700,美国Hyclone公司);T4连接酶(货号:2011A,日本Takara公司);人CCR9一抗(货号:ab32556,美国Abcam公司);有基质胶的Transwell(货号:356234,美国Corning公司);人淋巴细胞分离液(货号:DKW-KLSH-0100,深圳达科为生物公司)。
1.3 方法
1.3.1 SW480人结肠癌细胞的培养 SW480结肠癌细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM高糖完全培养基中,在37℃、5% CO2孵育箱贴壁培养,每隔3 d传代1次。
1.3.2 构建pLVX-puro-CCR9融合质粒 (1)CCR9的CDS序列获取 取健康人外周血5 mL,人淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC) ......
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