UTP23基因在A2780/Taxol细胞中表达及对紫杉醇化疗耐药的影响(2)
1 材料与方法1.1 细胞株及培养
上皮性卵巢癌细胞株A2780与上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780/Taxol均购于中国科学院细胞库,均使用含有10%胎牛血清的RPMI1640完全培养液,在37℃、5%CO2条件下恒温培养,取对数生长期细胞进行实验。
1.2 实验材料
胎牛血清购自Gibco公司,噻唑蓝(MTT)、RPMI1640培养液、紫杉醇均购自Sigma公司,BCA蛋白浓度测定盒购自碧云天生物技术公司,兔抗人UTP23抗体、兔抗人Bcl-2抗体、抗GAPDH抗体及相对应的二抗均购自美国Abcam公司,脂质体转染试剂、阴性对照转染试剂购自Santa Cruz公司,qRT-PCR试剂盒购自Takara公司。
1.3 RT-PCR测定UTP23基因表达
取对数生长期的A2780细胞与A2780/Taxol细胞,使用Trazol裂解液提取细胞总RNA ......
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