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编号:13062626
米非司酮治疗大鼠子宫内膜异位症发病的TGFβ—Smad机制研究(2)
http://www.100md.com 2017年3月25日 《中国现代医生》 2017年第9期
     1.2 方法

    子宫内膜异位症造模:大鼠麻醉、固定,清洁消毒开腹处皮肤,开腹分离结扎大鼠左侧子宫,纵向剪开宫腔,剥离子宫内膜,宫体与右侧腹膜壁层缝合,关腹,继续饲养。

    进行子宫内膜异位症造模后1周开始,喂给小鼠口服米非司酮(上海新华联制药有限公司生产,国药准字H10950202),小剂量组每日给予1次,每次10 mg/kg,大剂量组每日给予1次,每次100 mg/kg,连服3 d。

    1.3 免疫印迹法检测相关蛋白的表达

    取出大鼠的右侧腹膜壁层组织,通过组织形态学观察确认为子宫内膜异位组织生长,即为造模成功,将造模成功的子宫内膜组织充分匀浆后,加入等量蛋白行SDS-PAGE凝胶电泳及半干法转膜至硝酸纤维素膜。转膜后将硝酸纤维素膜用脱脂牛奶封闭,然后与第一抗体(1∶500)温孵4 h,无菌PBS漂洗3次后与HRP标记二抗(1∶200)室温反应1 h漂洗后显色,用凝胶成像分析系统测定光密度,进行蛋白表达的定量分析。

    1.4 统计学分析

    采用SPSS20.0统计学软件,计量资料行t检验 ......
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