1.2.2 乳腺癌分子測定及分型 ①乳腺癌分子测定。将手术切除的组织利用免疫组织化学法完成ER、PR、HER-2水平。取制备乳腺术后标本，采用10.0%甲醛液固定，石蜡包埋，制备4 μm厚连续切片。将切片放置在烘烤箱(60℃)下进行1 h烘烤，脱蜡至水，采用pH为7.2～7.4 PBS缓冲液3次清洗，每次3 min，采用浓度为3%H2O2溶液放在室温下进行20 min孵育，将组织中内源性过氧化物酶消除，采用PBS进行3次冲洗，每次3 min，加入1：10普通山羊血清进行15 min下孵育，减少非特异性抗原抗体结合。去除组织切片上的血清，滴加1抗(ER、PR、HER-2单克隆抗体)，4℃下过夜，室温下放置1 h，采用PBS进行3次清洗，每次3 min，加入生物素标记的二抗，孵育30 min，温度为37℃。加入辣根过氧化物酶，孵育30 min，温度为37℃，采用PBS进行3次清洗，每次3 min，DAB显色，苏木精复染8～10 s，中性树胶封片[9]。②乳腺癌分子亚型。根据ER、PR、HER-2水平将乳腺癌分为四种亚型：Luminal A型、Luminal B型、HER-2+型和TNBC型[10] ......