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编号:13089064
优化RT—PCR检测试剂在流感病毒检测中的应用评价(1)
http://www.100md.com 2017年10月8日 《中国现代医生》 2017年第21期
优化RT—PCR检测试剂在流感病毒检测中的应用评价,乙型流感病毒,逆转录聚合酶链反应,核酸
     [摘要] 目的 探讨优化的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测试剂在流感病毒检测中的应用。 方法 选取乙型流感病毒Yamagata系细胞毒株1株对其倍比稀释,取高、中、低三个稀释浓度提取流感病毒核酸作为模板,采用具有高扩增效率的SpeedStar HS DNA聚合酶和HiScript Ⅱ Reverse Transcriptase逆转录酶进行PCR反应体系优化,并用优化试剂对三个浓度的流感病毒模板进行批间和批内重复性试验,与常规试剂TaKara One Step PrimeScript RT-PCR Kit反应试剂盒进行对比研究。 结果 优化试剂的PCR反应体系整个扩增反应时间从96 min缩短至55 min;通过Ct值比较,中、低浓度条件下的扩增效率与常规TAKARA试剂比较差异有统计学意义(P<0.05);组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);该试剂的组内试验和组间试验的变异系数均小于2% ......
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