1.5 細胞免疫化学检测Cyr61蛋白的表达

    正常皮肤细胞及增生性瘢痕细胞种植于放有盖玻片的6孔板，用4%的多聚甲醛于室温固定10 min，用PBS冲洗三次，在常温利用0.2%Triton X-100透化5 min。冲洗后用5%的BSA封闭30 min，1：50的兔抗人Cyr61抗体孵育过夜。清洗后，用1：50稀释的结合FITC的山羊抗兔抗体避光常温孵育1 h。用PBS清洗后，将盖玻片取出，置于滴有缓冲甘油的载玻片上，用激光共聚焦显微镜(OLYMPUS)观察，发射光波长495 nm，激发光波长488 nm。

    1.6 统计学方法

    采用SPSS 16.0统计学软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用 t 检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞中Cyr61的mRNA检测

    为检测Cyr61的mRNA表达水平，我们利用实时PCR分析。本实验增生性瘢痕Cyr61mRNA的表达高于正常皮肤(P<0.05) ......