1 资料与方法

    1.1 一般资料

    筛选2012年11月～2015年4月在宁波市第一医院泌尿外科就诊的男性不育患者293例，年龄20～50岁，平均(27.64±4.57)岁，均有不育史，其中非梗阻性无精子症159例，严重少弱精子症134例。精液分析及无精子症、严重少精子症的诊断均按照WHO第5 版《人类精液检查与处理实验室手册》要求进行[6]，即连续3次精液检查并经离心沉淀检测均无精子者为无精子症，3次精子浓度均<5.0×106个/mL者为少弱精子症。此外，本研究选取40例健康生育男性作为阳性对照，和10例女性作为阴性对照，以此监测样本是否污染。

    1.2 研究方法

    Y染色体微缺失检测：本研究参照欧洲男科学会和欧洲分子遗传质量网联合推荐的体系及位点，即在每个AZF区域使用2个序列标签位点：SY84(AZFa)、SY86(AZFa)、SY127(AZFb)、SY134(AZFb)、SY254(AZFc)、SY255(AZFc)。利用这6个序列标签位点通过两套多重聚合酶链反应(PCR)扩增：Ⅰ组为SY254、SY86、SY127，Ⅱ组为SY255、SY84、SY134。

    本研究直接用外周血作為底物扩增，改良强力多重PCR技术体系，PCR反应体系为20 μL ......