隐丹参酮对乳腺癌MDA—MB—231细胞迁移、侵袭的影响及其机制(2)
1 材料与方法1.1 材料来源
乳腺癌 MDA-MB-231細胞购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库;隐丹参酮购自成都曼思特生物科技有限公司(纯度>98%)(图1)。将隐丹参酮溶于DMSO配制成等20 mmol/L的储备液,分装后于-20℃储存,避光保存;使用时用无血清 RPMI 1640 培养液稀释为5 μmol/L,10 μmol/L,20 μmol/L,40 μmol/L的工作液,DMSO终浓度为 0.1%,对照组为含0.1% DMSO的细胞培养液。胎牛血清和 RPMI 1640 培养基购自Hyclone 公司;兔抗人 c-Src、p-c-SrcTyr416、FAK、p-FAK Tyr576/577、MMP2和 β-actin 抗体和辣根过氧化物酶标记山羊抗兔 IgG购自 Cell Signaling Technology公司;Bradford蛋白浓度测定试剂盒购自美国Bio-Rad公司;Transwell 小室购自Corning公司;Matrigel基质胶购自美国 BD 公司;结晶紫染色液和RIPA裂解液购自碧云天生物技术有限公司 ......
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