1.2 免疫组化

    Klk6抗体来自美国R&D公司，Her-2、Ki-67抗体和SP免疫组化试剂盒均來自福州迈新生物技术开发公司。组织采用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，连续4 μm厚切片，采用链霉卵蛋白素染色(SP法)检测Klk6、Her-2、Ki-67蛋白。按SP免疫组化试剂盒(福州迈新生物技术开发公司)说明书进行基本步骤：切片脱蜡→冲洗→PBS稀释的山羊血清封闭→冲洗→加生物素标记二抗工作液→PBS冲洗→滴加适量的碱性磷酸酶标记的链霉卵白素工作液→PBS冲洗→DAB液显色→苏木精复染→梯度酒精脱水干燥→二甲苯透明→中性树胶封片→镜下观察。

    1.3 结果判定

    (1)Klk6蛋白染色结果判定标准：主要是子宫内膜腺上皮细胞质中呈棕色颗粒为阳性细胞，随机观察10个高倍镜视野(×400)并计数，每个视野至少计数100个细胞，取其平均值为该病例的细胞阳性率。视野中无细胞阳性着色或阳性细胞<10%为阴性(0)，阳性细胞在10%～50%为阳性(1+)，阳性细胞>50%为强阳性(2+)。(2)Her-2蛋白定位于细胞膜上，染色结果根据阳性信号强度及着色方式进行评估：无阳性细胞或膜阳性细胞<10%为阴性(0) ......