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编号:13579047
急性淋巴细胞性白血病患儿骨髓中NF—κB的表达及临床意义(2)
http://www.100md.com 2018年6月25日 《中国现代医生》 201818
     1.2 实验方法

    RNA反转录与提取:总RNA提取采用Trizol法,检测总RNA浓度及完整性,使用RevertAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit(Fermentas公司)进行反转录反应,按试剂盒说明操作,反转录反应条件:42℃ 62 min,72℃ 5 min,4℃ 5 min,保存备用于-20℃。PCR实时定量扩增:在实时荧光定量PCR(ABI3700)上进行扩增。TAKARA设计合成NF-κB基因引物。上游引物序列(5’ CTGAACCAG GGCATACCTGT3’),下游引物序列(5’ GAGAAGTCCATGTCCGCA AT3’),扩增产物197bp;内参GAPDH下游引物序列(5’ TCTCTCTTCCTCTTGTGCTCTTGG3’),扩增产物206 bp。PCR反应液SYBR Prime ScriptTM RT-PCR Kit(Perfect Real Time ......
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