1.6 脑脊液和中缝核miR-16测定

    采用实时荧光定量PCR法测定。首先，提取脑脊液、中缝核总RNA(北京天根生化科技有限公司)，取2 μg RNA进行反转录获得cDNA，随后进行实时荧光定量PCR扩增。目的基因miR-16的上游引物与其本身序列一样，为5’-TAGCAGCACGTAAATTGGCG-3’。将U6做为校正基因，上游引物序列为5’-ACGCAAATTCGTGAAGCGTTCCAT-3’。miR-16与U6的下游引物相同，由试剂盒自带[miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green)，北京天根生化科技有限公司]。PCR扩增程序为：94℃预变性 2 min，94℃变性20 s，52℃退火30 s，72℃延伸30 s，循环40次。根据扩增曲线获得Ct值，并将其用对应的U6值进行校正。

    1.7 统计学方法

    采用SPSS19.0统计软件分析数据。糖水消耗率、旷场实验水平得分垂直得分、脑脊液miR-16、中缝核miR-16、中缝核SERT水平为计量资料，对照组与模型组之间的比较采用独立样本t检验;脑脊液miR-16、中缝核miR-16、中缝核SERT水平为连续型计量资料 ......