Lgr5和β-catenin蛋白在胃癌组织中的表达(2)
1 资料与方法1.1 一般资料
本次研究随机选取的标本均取自嘉兴市第一医院2012年1月~2017年12月间门诊或住院患者80例,所有胃癌组织标本均经手术切除并经病理学证实,包括男49例,女31例,年龄37~82岁。同时随机选取浅表性胃炎患者组织标本30例,包括男14例,女16例,年龄27~71岁;随机选取萎缩性胃炎患者组织标本30例,包括男14例,女16例,年龄33~73岁。二者组织标本均取自胃镜活检并经病理学证实。本次研究所选取的患者病理组织标本均保存完好并具有完善的临床资料。
1.2主要试剂
Lgr5蛋白抗体试剂,购自英国Abcam公司,克隆号:ab75732,工作浓度:1∶100;β-catenin蛋白抗体试剂,购自北京中杉金桥生物技术有限公司,克隆号:UMAB 15,工作浓度:1∶100。
1.3 方法
1.3.1 检测方法 利用免疫组化染色SP法对Lgr5和β-catenin蛋白的表达进行检测,阳性对照选取已知阳性的切片,阴性对照选取每种抗体的Tris作为一抗的代替。本研究的所有免疫组化方法均按照说明书步骤严格进行。
1.3.2 判定方法 ①Lgr5结果判定:主要通过参照Fromo-witz综合计分法[7]进行双盲半定量观察分析,整个结果判断过程由2位工作经验丰富的病理科医师进行判读,Lgr5的主要阳性着色部位位于细胞膜及细胞质,呈浅黄色、棕黄色及深褐色颗粒 ......
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