用EP管收集培养板内转染后PC-3细胞的上清液，将上清液经过1000 r/min的转速离心5 min后，收集EP管底部的沉淀细胞。同时，用胰酶协助收集贴壁的细胞后，同转速离心5 min，再收集细胞。每个组别均用500 μL 1×binding buffer重悬细胞，并慢慢吹打均匀。加入Annexin V(别藻青蛋白标记)5 μL和碘化丙啶5 μL，混合均匀。在避光的条件下，室温20°C孵育30 min，上流式细胞仪检测。

    1.5 生物信息学检测

    利用TargetSCan human7.0 和starbase V2.0进行生物信息学分析查找目标靶点。此项工作委托上海锐赛生物技术有限公司进行。

    1.6 双萤光素酶报告实验

    1.6.1 双萤光素酶报告载体质粒的构建 通过萤光素酶报告载体 psiCHECK-2，构建出野生型psiCHECK -SCHLAP1-wt-3’UTR。 通过突变SChLAP1 3’UTR 中与miR-101-5P互补的序列，从而构建突变型 psiCHECK-SChLAP1-mu-3’UTR。

    1.6.2 細胞的分组、转染和检测 实验报告采用293细胞系 ......