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编号:13370715
Toll样受体在不同转移能力人乳腺癌细胞株中的差异表达及意义研究(2)
http://www.100md.com 2019年6月15日 《中国现代医生》 2019年第17期
     1.2 标本收集

    研究数据采集期间收集牡丹江医学院红旗医院乳腺癌患者100例,均获得最终手术病理结果,术前行常规超声检查,记录病灶的大小(纵横比)、形状是否规则、边界是否清晰、内部有无小钙化、后方伴或不伴回声衰减等特点。研究时间为2016年12月~2017年12月,确保样本的保存空间和温度,避免受其他不良因素对样本的影响。

    1.3 方法

    1.3.1 细胞培养 MDA-MB-231、MCF-7细胞株均购自上海中国科学院细胞库。采用10%胎牛血清RPMI 1640细胞培养液对MDA-MB-231进行培养,采用10%胎牛血清及0.01 g/L牛胰岛素的DMEM細胞培养液对MCF-7进行培养,在容量为50 mL培养瓶中接种,温度设置为37℃,CO2浓度为5%,培养48 h后更换培养液,待其进入对数生长周期予以收获。

    1.3.2 总RNA提取及逆转录 在1 mL Trizol中添加2.0×106个细胞,经过分层、沉淀及洗涤后,半干后采用0.1% DEPC进行水解 ......
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