1.2.8 实时定量QPCR检测 采用promega公司的RNA小提试剂盒提取各组大鼠心脏组织的总RNA。将提取的总RNA逆转录成cDNA后，荧光定量PCR检测NT-proBNP、hFABP、cTnI、Bcl-2、Bax的表达水平。各检测基因的QPCR引物见表2。QPCR结果采用2-△△Ct法计算相对表达量。

    表2 实时定量QPCR引物

    1.2.9 Western blot检测 各组大鼠于梗死后的12 h处死，于冰上取出心脏组织约100 mg，加入RIPA蛋白裂解液并研磨至液态，至4℃离心机以12000 rpm离心10 min，吸取上清加入4倍体积的SDS loading buffer，混匀后放入100℃水浴5 min。取30 μg的蛋白裂解液加入8% SDS-PAGE凝胶中分别以60 V和100 V电压进行蛋白浓缩和分离，然后转至PVDF膜，以10%脱脂奶粉室温封闭2 h后，加入抗体，4℃过夜孵育后 ......