[摘要] 目的 探討多重荧光定量PCR测定登革热Ⅰ～Ⅳ型方法的建立与初步评价。 方法 针对登革热Ⅰ～Ⅳ型使用自建的引物探针对反应条件及温度进行调整，且对阳性样本进行不同浓度的稀释，检测自建多重荧光定量PCR在登革热Ⅰ～Ⅳ型测定中的重复性、灵敏性及特异性。 结果 6份登革热阳性样本通过自建的检测方法来进行检测，全部能够显示明显的S曲线扩增，且与原有确证方法相比，不同型别的结果一致。其他10份病毒阳性样本及阴性样本全部没有显示扩增曲线，提示自建的检测方法特异性良好。分别检测登革热Ⅰ～Ⅳ型，变异系数(CV%)值水平范围：0.51～5.51，提示重复性较好。使用自建的多重荧光定量PCR对登革热不同型别进行检测的平均用时与ELISA法相比无显著差异(t=1.561，P>0.05)。通过自建的多重荧光定量PCR测定通过仪器来完成核酸的自动提取 ......