CDK13基因对缺氧性脑损伤小鼠细胞凋亡的影响(2)
1 材料与方法1.1 实验动物
通过改良的线栓法建立小鼠大脑中动脉梗死模型(middle cerebral artery occlusion model,MCAO)。野生型(CDK13+/+)C57BL/6小鼠和CDK13基因敲除型(CDK13-/-)小鼠各10只,雌雄不限,由广州赛业生物科技公司提供。将野生型(CDK13+/+,WT)和CDK13基因敲除型(CDK13-/-,KO)小鼠按照随机分组法分为假手术组(SKO和SWT组)和模型组(MKO和MWT组),分别进行PCR反应、TTC染色、TUNEL及免疫组化检测[10]。
1.2 方法
1.2.1 PCR反应法检测CDK13基因表达 高压灭菌的1.5 mL离心管中,加入50 mM NaOH适量,用酒精给小鼠组织及器械消毒,100℃水浴30 min,组织基本溶解后数秒,加入浓度为1 mmol/L的tris-HCL(pH=8.0),离心后取上清液,加入无水乙醇,再次离心,沉淀即得小鼠DNA。循环条件如下:95℃预变性2 min;95℃变性15 s ......
您现在查看是摘要页,全文长 4209 字符。