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编号:1970895
地西他滨诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡机制的研究
http://www.100md.com 2020年4月11日 《中国现代医生》 2020年第1期
     1.6 透射电镜观察亚细胞结构

    (1)取材:取对数生长期的ALL Jurkat细胞株,将细胞密度调至1×105个/mL接种于75 mL培养瓶中,培养24 h后,实验组分为3组,每孔加入浓度为5.0 μmol/L的地西他滨培养液,继续培养72 h;阴性对照组加入等量的1640完全培养基。取对照组和实验组细胞,PBS洗涤一遍,离心(2000 rpm,15~20 min)于EP管底部。(2)固定:2.5%戊二醛,磷酸缓冲液配制固定2 h或更长时间,用0.1 M磷酸漂洗液漂洗15 min 3次,1%锇酸固定液固定2~3 h用0.1 M磷酸漂洗液漂洗15 min 3次;(3)脱水:50%乙醇15~20 min,70%乙醇15~20 min,90%乙醇15~20 min,90%乙醇、90%丙酮(1:1)15~20 min,90%丙酮15~20 min,以上在4℃冰箱内进行100%丙酮室温15~20 min 3次;(4)包埋:纯丙酮+包埋液(2:1)室温 3~4 h ......

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