1.2 方法

    1.2.1 血样的采集及DNA提取 于清晨空腹状态下，取受试者外周静脉血各3 mL，加入EDTA抗凝管内，充分摇匀后保存于-20℃条件待测;采用QIAamp全血基因组DNA快速提取试剂盒(Qiagen公司，美国)进行基因组DNA，操作过程严格按照试剂盒说明书执行，将提取的基因组DNA保存于-80℃条件，统一测序。①取200 mg组织，放到1.5 mL EP管中，加入1 mL Trizol剪碎，震荡30 s;②加0.2 mL氯仿，剧烈摇动30 s，室温3 min;③12 000×g，4℃离心，15 min;④吸上层无色水相，移入另一EP管中(约0.5 mL)，加等体积异丙醇，-20℃，30 min;⑤12 000×g，4℃ 离心，10 min。在管底部可见微量RNA沉淀;⑥弃上清，加75%乙醇1 mL，振荡;⑦7500×g，4℃离心，10 min;⑧弃上清，用滤纸小心吸取残留液体，室温干燥5～10 min;⑨沉淀溶于20 μL DEPC水，取1 μL加入79 μL DEPC水测OD260/OD280;⑩计算浓度与纯度，-70℃保存。

    1.2.2 聚合酶链反应(Polymerase chain reaction，PCR)法测定FTO基因多态性位点基因型 采用PCR技术 ......