1.2 方法

    1.2.1 标本处理 向标本(如痰液)中加入等体积10%NaOH溶液，涡旋振荡，根据液化情况考虑延长液化时间或增加0.5～1.0 mL 10% NaOH溶液。

    1.2.2 核酸提取 ①将核酸提取管10 000 rpm离心1 min备用;②将液化后的样品取1 mL上清到1.5 mL离心管中，12 000 rpm离心5 min，弃上清;③向离心管中加入1 mL生理盐水，同一份样品用1 mL生理盐水转移至一个离心管中，旋涡振荡混匀，12 000 rpm 离心5 min，弃上清;④向每个离心管中加入50 μL核酸提取液，用移液器吹吸沉淀，将液体和沉淀一起转移到核酸提取管中;⑤将核酸提取管置于振荡器上，最大转速振荡5 min;⑥将核酸提取管置于95℃金属浴中，加热5 min;⑦10 000 rpm离心1 min，备用。⑧从4℃冰箱取出PCR扩增试剂，向每管加入2 μL模板DNA。每份PCR反應体系总体积为20 μL。

    1.2.3 核酸扩增 先将反应管放入PCR仪中进行PCR扩增反应 ......