miRNA–193a–3p 靶向TGF–β2 基因诱导肝癌细胞凋亡的分子机制研究
牡丹江,荧光素酶,培养液,1对象与方法,1研究对象,2细胞培养,3miR-193a-3p靶基因预测及双荧光素酶报告实验验证,4miR-193a-3p检测,5HepG2细胞活性的检
鞠宝玲 海艳洁 鄂志野 张红军1.牡丹江医学院免疫教研室,黑龙江牡丹江 157001;2.牡丹江医学院红旗医院肿瘤科,黑龙江牡丹江 157001
肝癌是世界范围内发病率较高的恶性肿瘤,具有患病率高、转移性强的特点。目前临床上治疗肝癌主要采用手术切除、辅助化疗及靶向治疗等,但易复发和转移,预后较差,5 年生存率较低。研究表明,非编码小RNA 分子(microRNA,miRNA)作为癌基因或抑癌基因参与了肝癌的发生发展和转移过程,因此,探讨miRNA 在肝癌中发生、发展的相关分子机制,由此开发分子靶向治疗位点,对于提高肝癌的临床疗效具有重要意义。本研究选取2019 年1 月至2021 年12 月在牡丹江医学院红旗医院收治的肝癌患者30 例,分析了目标miRNA 在肝癌发生发展中的作用及其作为分子靶向治疗位点的可行性,现报道如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象
选取2019 年1 月至2021 年12 月在牡丹江医学院附属红旗医院进行手术切除的肝癌患者30 例,其中男性18 例,女性12 例;患者年龄40~69 岁,平均年龄(55.62 ± 7.93)岁;TNM 分期I期8 例,Ⅱ期10 例,Ⅲ期12 例;高中分化19 例,低未分化11 例,所有患者术前均未接受新辅助化疗,且临床资料完整。留取肝癌组织和相应癌旁正常组织(距离肝癌组织边缘2cm 以上,经病理确认无癌细胞浸润正常组织),手术取材后立即置于–80℃冻存备用。本研究经牡丹江医学院医学伦理委员会批准(伦理学审批号:20210304–50),所有研究对象均签署知情同意书。
1.2 细胞培养
肝癌HepG2 细胞系购自美国ATCC 细胞库,HepG2 细胞株接种于含10%胎牛血清的DMEM(dulbecco's modification of eagle’s medium,DMEM)完全培养液,置于37℃,5% CO恒温箱中培养 ......
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