超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定蔬菜中的三十七种农药残留
我国新颁布的GB/T 2763-2014《食品中农药最大残留限量》，将于8月1日起开始施行，食品农药最大残留限量指标新增1357项。面对大量的受管控农药和很低的允许残留量，开发高灵敏分析方法显得更为迫切。本文参考美国AOAC规定的样品前处理方法，使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱LCMS-8050联用，建立了蔬菜中37种例行监测农药的超高效液相色谱——三重四极杆串联质谱联用的分析方法。
实验
仪器
本实验使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A与三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统。具体配置为LC-30AD×2输液泵，DGU-20A5在线脱气机，SIL-30AC自动进样器，CTO-30A柱温箱，CBM-20A系统控制器，LCMS-8050三重四极杆质谱仪。
分析条件
, http://www.100md.com
液相色谱条件
分析仪器：LC-30A系统；
色谱柱：Shim-pack XR-ODSIII， 2.0mm I.D.×150mm L，2.2μm；
流动相：A：5mM醋酸铵+0.02%甲酸水溶液；B：甲醇；
流速：0.4mL/min；
进样体积：1μL；
柱温：40℃；
洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为10%。质谱条件
分析仪器：LCMS-8050；
离子源：ESI，正负离子同时扫描；
, 百拇医药
离子源接口电压：+ 4 . 5 k V；-3.5kV；
雾化气：氮气3.0L/min；干燥气：氮气10L/min；加热气：氮气10L/min；碰撞气：氩气；脱溶剂管温度：250℃；加热模块温度：400℃；接口温度：250℃；扫描模式：多反应监测(MRM)；驻留时间：10ms；延迟时间：3ms。
样品制备
样品前处理方法：参照美国AOAC 2007.01QuEChERS样品前处理方法，使用岛津技迩QuEChERS产品进行样品前处理。取15g均质样品加入50mL离心管中，加入15mL乙腈/甲酸(99/1，v/v)提取液，涡混后加入6gMgSO4和1.5gNaOAc，迅速进行振荡，然后离心5min(8000rpm)。取上清液1mL，加入盛有150mgMgSO4，5 0 m g P S A，50mgC18粉末的离心管中，涡混离心，上清液过滤膜后上机。
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标准溶液配制：用甲醇配制500mg/L，37种混合标准溶液，用基质提取液逐级稀释成0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的不同浓度的标准样品。
结果与讨论
线性关系
将配制的0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L不同浓度的标准溶液，按上述分析条件进行测定，外标法制作校准曲线，线性良好。
精密度实验
对0.5μg/L、1.0μg/L和5.0μg/L混合标准溶液连续6次进样，考察仪器的精密度，其保留时间和峰面积的重复性结果如表1所示。3个浓度标准品的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之间，仪器精密度良好。
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基质提取液加标精密度实验
用空白的普通白菜、甘蓝、菜豆三种基质提取液加混标至浓度为5μg/L，连续20针进样，考察保留时间和峰面积稳定性，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.22%和0.63%～4.93%之间。具体结果如表2。
回收率实验
将空白甘蓝样品进行5.0μg/L和50.0μg/L浓度加标后，按照上述样品制备方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD。具体结果见表3。5.0μg/ L加标回收率在80.5%～105.2%之间，50.0μg/L加标回收率在89.6%～104.5%之间。
实际样品分析
, http://www.100md.com 对市售普通白菜进行分析后，检出多菌灵、三唑酮、咪鲜胺和哒螨灵，具体结果及色谱图见表4、图1。
结论
建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-3 0A和三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用测定蔬菜样品中37种农药的方法，在20min内完成37种农药的分离。不同浓度的精密度实验结果表明：保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.17%和0.59%～4.89%之间，仪器精密度良好；校准曲线相关系数均大于0.995；仪器检出限在0.002～0.143μg/L之间，定量限在0.0072～0.433之间；不同蔬菜基质中5μg/L浓度加标的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之间；采用QuEChERS前处理方法的加标回收率在80.5%～105.2%之间。该方法分析速度快、重复性好、灵敏高，适合蔬菜中常用农药的高灵敏度检测。, http://www.100md.com(高慧 李长坤 李月琪)
实验
仪器
本实验使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A与三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用系统。具体配置为LC-30AD×2输液泵，DGU-20A5在线脱气机，SIL-30AC自动进样器，CTO-30A柱温箱，CBM-20A系统控制器，LCMS-8050三重四极杆质谱仪。
分析条件
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液相色谱条件
分析仪器：LC-30A系统；
色谱柱：Shim-pack XR-ODSIII， 2.0mm I.D.×150mm L，2.2μm；
流动相：A：5mM醋酸铵+0.02%甲酸水溶液；B：甲醇；
流速：0.4mL/min；
进样体积：1μL；
柱温：40℃；
洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为10%。质谱条件
分析仪器：LCMS-8050；
离子源：ESI，正负离子同时扫描；
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离子源接口电压：+ 4 . 5 k V；-3.5kV；
雾化气：氮气3.0L/min；干燥气：氮气10L/min；加热气：氮气10L/min；碰撞气：氩气；脱溶剂管温度：250℃；加热模块温度：400℃；接口温度：250℃；扫描模式：多反应监测(MRM)；驻留时间：10ms；延迟时间：3ms。
样品制备
样品前处理方法：参照美国AOAC 2007.01QuEChERS样品前处理方法，使用岛津技迩QuEChERS产品进行样品前处理。取15g均质样品加入50mL离心管中，加入15mL乙腈/甲酸(99/1，v/v)提取液，涡混后加入6gMgSO4和1.5gNaOAc，迅速进行振荡，然后离心5min(8000rpm)。取上清液1mL，加入盛有150mgMgSO4，5 0 m g P S A，50mgC18粉末的离心管中，涡混离心，上清液过滤膜后上机。
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标准溶液配制：用甲醇配制500mg/L，37种混合标准溶液，用基质提取液逐级稀释成0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的不同浓度的标准样品。
结果与讨论
线性关系
将配制的0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L不同浓度的标准溶液，按上述分析条件进行测定，外标法制作校准曲线，线性良好。
精密度实验
对0.5μg/L、1.0μg/L和5.0μg/L混合标准溶液连续6次进样，考察仪器的精密度，其保留时间和峰面积的重复性结果如表1所示。3个浓度标准品的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之间，仪器精密度良好。
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基质提取液加标精密度实验
用空白的普通白菜、甘蓝、菜豆三种基质提取液加混标至浓度为5μg/L，连续20针进样，考察保留时间和峰面积稳定性，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.22%和0.63%～4.93%之间。具体结果如表2。
回收率实验
将空白甘蓝样品进行5.0μg/L和50.0μg/L浓度加标后，按照上述样品制备方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD。具体结果见表3。5.0μg/ L加标回收率在80.5%～105.2%之间，50.0μg/L加标回收率在89.6%～104.5%之间。
实际样品分析
, http://www.100md.com 对市售普通白菜进行分析后，检出多菌灵、三唑酮、咪鲜胺和哒螨灵，具体结果及色谱图见表4、图1。
结论
建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-3 0A和三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用测定蔬菜样品中37种农药的方法，在20min内完成37种农药的分离。不同浓度的精密度实验结果表明：保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.17%和0.59%～4.89%之间，仪器精密度良好；校准曲线相关系数均大于0.995；仪器检出限在0.002～0.143μg/L之间，定量限在0.0072～0.433之间；不同蔬菜基质中5μg/L浓度加标的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之间；采用QuEChERS前处理方法的加标回收率在80.5%～105.2%之间。该方法分析速度快、重复性好、灵敏高，适合蔬菜中常用农药的高灵敏度检测。, http://www.100md.com(高慧 李长坤 李月琪)