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编号:13229245
牛奶中β-内酰胺高灵敏度检测试剂条研制(胶体金法)
http://www.100md.com 2018年5月1日 《食品安全导刊》 2018年第5期
     目前,快速检测试剂条一般采用抗原抗体反应的原理来检测目标检测物。但是由于牛奶样本中蛋白质含量较高,容易干扰检测结果,且对于灵敏度要求高,普通的抗体无法达到现场检测灵敏度的要求。胶体金法采用受体结合的原理来检测目标物,由于受体结合的亲和力是抗原抗体结合亲和力的两个数量级以上,因此在牛奶中使用受体结合的原理来制备β-内酰胺高灵敏度检测试剂条成为一个有效的手段。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    阳性奶样、阴性奶样、酪蛋白、Tris、BSA、Borax等化学试剂(采购自Sigma)。镍柱(GE life)、PET-30a质粒(通用生物)、β-内酰胺BSA偶联物(购自杭州隆基生物)。

    1.2 仪器与设备

    高速冷冻离心机(湘仪)、摇床(湘仪)、蛋白分离柱(Bio-Rad)、分光光度计(新世纪)。

    1.3 方法

    1.3.1 重组β-内酰胺受体制备

    1.3.1.1 单克隆阳性菌体制备

    ①将合成的质粒冻干粉使用100μL灭菌超纯水稀释 ......

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