复方多糖的葡聚糖凝胶分离及纯度鉴定(2)
3.2.3 纸层析法
称取葡聚糖凝胶分离后的多糖0.0502g,加入10mL蒸餾水配成0.5%多糖溶液,滤纸尺寸为(4cm×23cm),以正丁醇:乙醇:水=4:1:5为展开剂,室温展开6h,苯胺磷酸盐为显色剂,100℃,显色10min。
4. 实验结果与讨论
4.1 洗脱效果与讨论![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-1-l.jpg)
![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-2-l.jpg)
![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-3-l.jpg)
由图1、图2、图3、图4、图5可以看出,以0.2mol·L-1NaCl溶液为洗脱剂所得的曲线峰形及对称性较好,因此可确定用葡聚糖凝胶分离复方免疫增强剂中多糖的最佳洗脱剂为0.2mol·L-1的NaCl溶液。
4.2 纯度鉴定结果与讨论![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-4-l.jpg)
4.2.1 紫外光谱法
由以上数据可以看出,在260nm和280nm处样品无吸收峰,说明此多糖样品中不含蛋白质和核酸。![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-5-l.jpg)
4.2.2 凝胶色谱法
由以上数据和图形可以看出,得到的曲线是单一对称峰,说明此多糖样品为均一组分。
4.2.3 纸层析
经显色烘干后可见滤纸上只有一个斑点,可说明此多糖样品为均一组分。
5 结论
以0.2mol·L-1的NaCl溶液为洗脱剂,使用Sephadex G-200可有效分离纯化复方免疫增强剂中多糖,达到最佳分离效果。
经紫外光谱法、凝胶色谱法、纸层析法、旋光度法鉴定,由Sephadex G-200分离纯化出的复方多糖为均一组分。
参考文献:
[1] 傅博强,谢明勇,周鹏.茶叶多糖的提取纯化、组成及药理作用研究进展.南昌大学学报(理科版),2001,25(4):358-364.
[2] 林卓坤.色谱法(一),科学出版社,1982.1:61-69.
[3] 甘璐,张声华.枸杞多糖纯度与四个级分含量的测定.食品科学,1999.1:52-53.
[4] 张林维,赵帜平,沈业寿.当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究.生物学杂志,1998,15(3):12-14.
[5] 周光碗,胡晓倩.生物化学仪器分析与实验技术.化学工业出版社,2003:9-22., 百拇医药(郑亚玲)
称取葡聚糖凝胶分离后的多糖0.0502g,加入10mL蒸餾水配成0.5%多糖溶液,滤纸尺寸为(4cm×23cm),以正丁醇:乙醇:水=4:1:5为展开剂,室温展开6h,苯胺磷酸盐为显色剂,100℃,显色10min。
4. 实验结果与讨论
4.1 洗脱效果与讨论
![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-1-l.jpg)
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由图1、图2、图3、图4、图5可以看出,以0.2mol·L-1NaCl溶液为洗脱剂所得的曲线峰形及对称性较好,因此可确定用葡聚糖凝胶分离复方免疫增强剂中多糖的最佳洗脱剂为0.2mol·L-1的NaCl溶液。
4.2 纯度鉴定结果与讨论
![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-4-l.jpg)
4.2.1 紫外光谱法
由以上数据可以看出,在260nm和280nm处样品无吸收峰,说明此多糖样品中不含蛋白质和核酸。
![](/images/paper/1674-0270/201808/20180824-5-l.jpg)
4.2.2 凝胶色谱法
由以上数据和图形可以看出,得到的曲线是单一对称峰,说明此多糖样品为均一组分。
4.2.3 纸层析
经显色烘干后可见滤纸上只有一个斑点,可说明此多糖样品为均一组分。
5 结论
以0.2mol·L-1的NaCl溶液为洗脱剂,使用Sephadex G-200可有效分离纯化复方免疫增强剂中多糖,达到最佳分离效果。
经紫外光谱法、凝胶色谱法、纸层析法、旋光度法鉴定,由Sephadex G-200分离纯化出的复方多糖为均一组分。
参考文献:
[1] 傅博强,谢明勇,周鹏.茶叶多糖的提取纯化、组成及药理作用研究进展.南昌大学学报(理科版),2001,25(4):358-364.
[2] 林卓坤.色谱法(一),科学出版社,1982.1:61-69.
[3] 甘璐,张声华.枸杞多糖纯度与四个级分含量的测定.食品科学,1999.1:52-53.
[4] 张林维,赵帜平,沈业寿.当归多糖的分离纯化及其部分性质的研究.生物学杂志,1998,15(3):12-14.
[5] 周光碗,胡晓倩.生物化学仪器分析与实验技术.化学工业出版社,2003:9-22., 百拇医药(郑亚玲)