□ 邱 纯 佛山市质量计量监督检测中心

    1 前言

    因质谱仪分析大分子量蛋白质的灵敏度较分析小分子量的胜肽低，故使用酵素对蛋白质进行专一性的水解反应，将大分子的蛋白质切成小片段胜肽，消化为适当的大小及长度(以6～20个胺基酸组成的胜肽最适合)，利于仪器作出精确的判断。胰蛋白酶Trypsin是最常使用于蛋白质分解的蛋白酶，易于纯化、产量高且专一性强，Trypsin剪切赖氨酸Lysine和精胺酸Arginine的碳端(C端)位置，但若与C端连接的胺基酸为脯胺酸Proline，则不水解此键结。许多蛋白质中富含Lysine及Arginine，则Trypsin水解后的胰蛋白胜肽片段(Trypticpeptide)，便于送入后续的质谱仪分析，这也是Trypsin被广泛使用的原因。

    2 药品与仪器

    2.1 实验药品

    触媒、氢氧化钠、柠檬酸；指示剂、己烯；30%丙烯酰胺、十二烷基硫酸钠、催化剂、过硫酸铵等 ......