□ 付伟超 商丘市质量技术监督检验测试中心

    1 分子生物学方法

    1.1 聚合酶链式反应(PCR)

    聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)作为常见的一种分子生物学技术，其是在体外对特定的DNA片断进行放大扩增，然后对其扩增产物进行检测。在食品致病菌检测领域，使用PCR技术对特异DNA片段进行扩增从而快速地检测食品中的致病菌，能够同时分析多种致病性微生物，且速度快、灵敏度高，尤其适合人工无法培养或者培养难度较大的微生物。PCR技术虽然具有高灵敏度的优点，但是由于其存在技术缺陷，还不能从根本上替代常规的检测方法。首先是假阳性和假阴性问题，核酸污染是造成假阳性的主要原因，食品中复杂的成分能够抑制PCR反应导致假阴性。其次就是定量检测较为困难。因此，这也限制了PCR技术在致病菌检测中的推广使用。

    1.2 基因芯片(Genechip)技术

    作为一种大规模、高通量核酸分子杂交测序方法，基因芯片通过微加工技术将一系列已知次序探针固定于支持物表面，形成高密度的寡核苷酸阵列，被测食品样品经核酸提取、PCR扩增及标记后与芯片上的探针阵列产生互补匹配时，荧光扫描或酶联免疫反应后，依据杂交信号情况，最终定性或定量检测食品样品中的致病菌情况。由于该技术具有大规模、高通量、简单化的特点 ......